ALBASTRU LACTOFENOL: CARACTERISTICI, COMPOZIȚIE, PREPARAT, UTILIZĂRI - CHIMIE - 2025

Albastru lactofenol sau bumbac albastru este preparat cu proprietăți unice de colorant. Este utilizat în laboratoarele clinice pentru a colora în principal structurile fungice, cum ar fi hibele, tuburile germinale și sporii.

Ajută la diagnosticul prezumtiv sau preliminar al anumitor ciuperci, cu toate acestea, este întotdeauna recomandabil să consolidezi diagnosticul cu teste mai specifice, cum ar fi testele biochimice sau serologice.

Reprezentare grafică a petei albastru la lactofenol, petei cu colorat cu albastru lactofenol, preparat montat la microscop. Sursa: Public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Albastrul lactofenol este format din acid lactic, albastru anilin, glicerină, fenol și apă deionizată. Poate fi pregătit în laborator sau poate fi achiziționat gata de utilizare. Odată pregătit, este gata de utilizare, în niciun caz nu trebuie diluat, deoarece această acțiune va da rezultate teribile.

Concentrația componentelor sale o face ideală pentru colorarea structurilor fungice, deoarece fenolul elimină microbiota bacteriană însoțitoare, în timp ce acidul lactic generează un film protector în jurul structurii fungice. În cele din urmă, albastrul anilin are o afinitate de a adera la structurile ciupercii.

Bază

Cu albastru lactofenol, se realizează o colorare simplă a structurilor fungice ale unei anumite culturi micologice. Se numește simplu, deoarece folosește un singur colorant.

Albastru de lactofenol, în afară de colorare, acționează și ca clarificator al probei, datorită acțiunii comune a acidului lactic și a fenolului, în plus, fenolul se comportă ca un mordant și, în același timp, împiedică liza microorganismului prin inhibarea enzimelor hidrolitice care poate fi prezent.

În timp ce acidul lactic păstrează morfologia structurilor ciupercii.

Pe de altă parte, albastru anilin are proprietatea de a adera sau lega structurile care conțin chitină. Structurile sunt pătate de albastru deschis.

Trebuie menționat că peretele celular al microorganismelor fungice, în special mucegaiurile, conține chitină, motiv pentru care acest colorant este ideal pentru colorarea acestor microorganisme.

caracteristici

Soluția albastru de lactofenol este un colorant apos, ușor tulbure, apos, cu o culoare albastră deschisă. Rămâne stabil dacă este păstrat între 15 ° C și 25 ° C. Sticla trebuie ținută bine închisă. Este iritant și coroziv pentru piele și mucoase.

Compoziţie

Formula pentru prepararea unui litru de albastru lactofenol este următoarea:

-250 g / L acid lactic

-1,0 g / L albastru anilin sau albastru de metil

-500 g / L glicerină

-250 g / L fenol

-250 ml apă deionizată sau distilată.

Fenolul este dizolvat în apa încălzită anterior. Se adaugă acid lactic și glicerină și se amestecă foarte bine. În cele din urmă, albastrul de anilină se dizolvă. Se amestecă din nou și este gata de utilizare.

Porțiile pentru prepararea a 80 ml de soluție albastru de lactofenol sunt:

-20 g cristale fenol

-20 ml acid lactic

-40 ml glicerină sau glicerol

-20 ml apă distilată.

Utilizare

Este utilizat pentru a colora structurile fungice și, prin caracteristicile morfologice observate la nivel microscopic, pentru a putea face un diagnostic prezumtiv al ciupercii.

Proces

Colorarea structurilor fungice ale culturilor

- Luați o cultură pură a ciupercii ale cărei structuri trebuie respectate.

- De preferat să lucrați într-o capotă cu flux laminar, sau sub brichetă, folosind o mască și mănuși, deoarece este necesar să respectați standardele de biosiguranță, deoarece majoritatea matrițelor sunt ușor de răspândit în mediu și, prin urmare, reprezintă un pericol pentru operator.

- Pe o lamelă se pune o picătură de albastru lactofenol.

- Tăiați un pătrat mic de bandă adezivă de bună calitate și respectați-l foarte atent la capătul mânerului de platină sterilizat la rece.

- Mânerul de platină este abordat în partea cea mai superficială a coloniei fungice, iar cultura este atinsă foarte atent, exact acolo unde se află banda adezivă.

- Apoi este dus pe lamelă și așezat chiar pe picătură de albastru lactofenol, având grijă ca banda să fie perfect extinsă și lubrifiată cu colorantul. Mânerul de platină este îndepărtat foarte delicat.

- O altă picătură de albastru lactofenol este plasată pe bandă și un înveliș deasupra. Nu aplicați prea multă presiune pentru a nu distruge structurile ciupercii, deoarece acestea sunt extrem de fragile. Colorantul trebuie lăsat să acționeze aproximativ 3 până la 4 minute.

- După acest timp, preparatul este gata de observat la microscop, cu mărire de 10X sau 40X. Dacă este necesară observarea 100X, trebuie utilizat ulei de imersiune.

- Structurile ciupercii, în general, sunt pătate de albastru, cu excepția ciupercilor dematiace care își vor păstra culoarea maro caracteristică a acestui tip de ciupercă.

Colorarea directă a specimenului biologic

Dacă este necesară studierea unui eșantion biologic direct, cum ar fi spută, puroi, exudate, secreții, printre altele, acestea trebuie să aibă o procedură prealabilă pentru decontaminarea eșantionului. Soluția de NaOH este utilizată pentru acest lucru.

În cazul probelor de păr, acestea pot fi vopsite direct.

Mai mulți fire afectate (10 în total) sunt prelevate din leziunile prezumtive de tinea capită (zone alopecice) și așezate pe o lamelă (3 - 4 fire pe diapozitiv). Câteva picături de albastru lactofenol sunt așezate deasupra și acoperite imediat cu o copertă.

Prindeți glisorul cu forceps și încălziți ușor peste un arzător. Pentru a face acest lucru, faceți 3 până la 4 treceri rapide prin flacără. Observați microscopul la 40X și căutați spori în exterior sau în interiorul părului (ectotrix sau, respectiv, endothrix). Dacă este necesar, adăugați ulei de imersiune și observați la 100X.

Colorarea tubului germinativ în identificarea

După incubarea culturii prezumtive de Candida albicans în serul uman timp de 2 până la 4 ore la 37 ° C, o parte din soluție este luată și colorată cu albastru lactofenol. Preparatul este observat la microscop la 40X. Tubul germinativ este prezent, iar blastosporesele sunt pătate de un albastru strălucitor.

Fișă tehnică de securitate la lactofenol

Asociația Națională pentru Protecția împotriva Incendiilor (NFPA), stabilește fișa cu date de securitate pentru substanțele chimice în ceea ce privește riscul pe care îl reprezintă în funcție de diverse aspecte, acestea sunt simbolizate printr-un diamant colorat și un număr cuprins între 0- Patru.

Pericolele pentru sănătate sunt identificate în albastru, inflamabilitate în roșu, instabilitate sau reactivitate în galben și orice risc special în alb.

Sănătate

Riscul pentru sănătate pe care îl prezintă albastru lactofenolul conform NFPA este nivelul 3. Aceasta înseamnă că substanța este extrem de periculoasă atunci când este ingerată sau în contact direct cu pielea sau cu mucoasa.

Este o substanță puternic corozivă și iritantă.

În contact cu pielea și mucoasele provoacă arsuri severe.

Dacă este ingerat poate provoca dureri de cap, confuzie, letargie, inconștiență, stop respirator și chiar moarte.

caracter inflamabil

Conform NFPA, Lactophenol Blue este evaluat la nivelul 1 pentru inflamabilitate. Aceasta înseamnă că arde numai dacă este încălzit peste 94 ° C.

Instabilitate

Listat în conformitate cu NFPA la nivelul 0 (zero) din punct de vedere al reactivității. Aceasta înseamnă că nu are niciun risc de reactivitate, adică este o substanță stabilă chimic.

Pericole speciale

Nu oferă pericole speciale suplimentare.

Referințe

1. Laborator SAR. Lactofenol albastru. 2010. Disponibil la: labsar.com.
2. Laborator de chimie clinică aplicată. Lactofenol albastru. 2015. Disponibil la adresa: cromakit.es
3. Laboratoare Merck. Microscopie albastră lactofenol în soluție. 2017. Disponibil la: Utilizatori / Echipament / Descărcări
4. Card de urgență. Soluție albastru de lactofenol pentru colorarea fungilor. Universidad Pontificia Javeriana, Bogotá Columbia. 2014. Disponibil la adresa: javeriana.edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Tehnica de colorare a structurilor fungice cu coloranți vegetali ca alternativă nepoluantă. Bioagro, 2011; 23 (1): 65-68. Disponibil la: Redalyc.
6. Laborator Himedia. Bumbac lactofenol albastru. 2017. Disponibil de la: himedialabs.com
7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, Actor J, Dasgupta A. Teste biochimice și tehnici de colorare pentru identificare microbiană. Science Direct, 2017; 61-73. Disponibil de la: Elsevier