BUCLA BACTERIOLOGICĂ: CARACTERISTICI, TIPURI, UTILIZĂRI - BIOLOGIE - 2025

Bucla bacteriologic este un instrument de lucru utilizat de microbiologi pentru semănatul culturilor microbiene (bacterii sau fungi). Este poate instrumentul cel mai folosit de acești profesioniști.

Utilizarea sa pare simplă, dar în realitate necesită multă pregătire. Înainte de a începe semănatul, bucla trebuie sterilizată în arzătorul Bunsen, apoi se ia inoculul microbian care poate proveni dintr-o cultură lichidă sau o cultură solidă.

Tipuri de bucle bacteriologice. Sursa: Nu este furnizat niciun autor care poate fi citit de mașină. お や お asumat (bazat pe revendicări de copyright).

Odată ce inoculul este luat, acesta poate fi depus într-un mediu lichid sau însămânțat într-un mediu solid. După fiecare procedură, bucla este din nou sterilizată. Mânerul este potrivit și pentru fabricarea frotiurilor microbiene pe un tobogan.

Bucla bacteriologică are multe nume, inclusiv: bucla sau bucla de platină, bucla de inoculare sau bucla de semințe, cu toate acestea numele său real este bucla Kohle.

Materialul cu care este confecționat mânerul este în general un aliaj de nichel-crom (nichrom) sau platină. O altă varietate disponibilă pe piață sunt buclele bacteriologice de unică folosință din plastic.

Pe de altă parte, există mai multe tipuri de bucle bacteriologice, fiecare îndeplinește o funcție în cadrul sarcinilor efectuate de un microbiolog. Alegerea mânerului va depinde de ceea ce trebuie făcut.

De exemplu, pentru a efectua un striatum prin epuizare pentru a izola un microorganism, se folosește bucla de platină, care se termină într-un inel închis, indiferent dacă este calibrat sau nu.

Întrucât, dacă este vorba de semănarea unei probe de urină, unde este important să se cuantifice CFU, este necesar să se utilizeze bucla calibrată. De asemenea, pentru a inocula teste biochimice, care trebuie să fie semănate prin puncție, bucla acului este esențială. Este important ca mânerul să fie manipulat de personal instruit.

caracteristici

Buclele bacteriologice sunt alcătuite din două extreme. Un capăt corespunde mânerului sau bazei, în timp ce celălalt este mânerul în sine.

Baza sau mânerul

Baza servește la prinderea mânerului în timpul manipulării. De obicei este metalic, dar are un izolator termic pentru a preveni arderea operatorului atunci când vârful mânerului este sterilizat pe brichetă. Măsoară aproximativ 20 cm, deși poate fi mai lung. Are un fir pentru reglarea mânerului.

Mâner

Este sfârșitul funcțional, adică este partea care vine în contact cu microorganismele și cu mediile de cultură. Este format dintr-un fir fin care este introdus în bază.

Mânerul poate fi realizat din nichrom sau platină, motiv pentru care se numește uneori mâner de platină. Are o lungime de aproximativ 6,5 cm și are un ecartament de aproximativ 0,20 mm. Mânerul cu mânerul poate măsura 26,5 cm. Măsurătorile pot varia de la producător la producător.

Tipuri

Există mai multe tipuri de bucle bacteriologice și fiecare are o utilizare specifică. Tipurile de mânere sunt următoarele: mâner calibrat în formă de inel, mâner în formă de inel necalibrat, mâner drept sau ac, mâner cu spatule, mâner în formă de „L” și mâner cu vârf ascuțit.

Pe de altă parte, mânerele pot fi permanente sau de unică folosință. Cele pentru uz permanent sunt sterilizate în brichetă, fiind reutilizabile și foarte durabile. În timp ce de unică folosință sunt sterile din fabrică, acestea sunt utilizate o singură dată și aruncate.

Aplicații

Mâner inelar, ne calibrat

Este cel mai folosit mâner în laboratorul de microbiologie. Se folosește pentru a lua un inocul dintr-o suspensie microbiană (mediu lichid) sau o porție de colonie (mediu solid), pentru a fi însămânțate într-un alt mediu de cultură, fie un test biochimic, fie un mediu mai îmbogățit sau selectiv, după caz. De asemenea, este util pentru fabricarea frotiurilor microbiene pe un tobogan.

Cu acest tip de buclă, inoculul inițial poate fi strecurat. De asemenea, este proiectat astfel încât să alunece lin pe agar, fără a-l deteriora. Desigur, acest lucru necesită un personal instruit care să se ocupe de tehnica de însămânțare, aplicând forța și mișcările corecte pentru a face o striație bună.

Cu acest mâner se pot efectua diverse tehnici de însămânțare. De exemplu, mediile solide din vasele Petri sunt de obicei însămânțate prin epuizare (există mai multe tehnici, vezi video 1).

Această tehnică este destinată obținerii de colonii izolate pentru a le studia și identifica, în special atunci când eșantionul este polimicrobian, adică cultura nu este pură (conține mai mult de un tip de microorganism).

În schimb, panele sunt plantate într-un zig-zag simplu pentru a obține masă bacteriană, nefiind necesar în acest caz pentru izolarea coloniilor.

Uneori sunt folosite și pentru a lua anumite probe. De exemplu, Rojas și colab., Au folosit bucla bacteriologică pentru a colecta probe de țesut vaginal razuite de la șobolani.

Bucla bacteriologică cu vârful inelar, ne calibrată. Sursa: Pixinio.com

Mâner în formă de inel, calibrat

Acest mâner, după cum îi spune numele, este calibrat pentru a lua o cantitate specifică de suspensie microbiană. Se utilizează atunci când este necesar ca inoculul să se conformeze cu ceea ce este standardizat în domeniu.

De exemplu, este foarte frecvent pentru plantarea culturilor de urină. În acest caz, se poate utiliza o buclă calibrată de 0,01 ml și o buclă de 0,001 ml.

Trebuie menționat că mânerele calibrate au o marjă de eroare, care variază în funcție de unghiul cu care este prelevat eșantionul și de dimensiunea gurii containerului.

Dacă bucla de 0,001 ml este introdusă vertical într-un recipient cu gura mică (≤ 7 mm), cantitatea luată va fi cu 50% mai mică decât se dorește.

Acest lucru se întâmplă deoarece cu cât diametrul gurii recipientului este mai mic, cu atât tensiunea de suprafață este mai mare și, prin urmare, forțele de aderență dintre (sticlă - lichid) cresc. Acest lucru face ca încărcarea lichidă luată de mâner să fie mai mică.

Întrucât, dacă este luat la un unghi de 45 ° într-un recipient cu gura largă (≥ 22 mm), acesta poate colecta cu 150% mai mult decât cantitatea necesară. În acest caz, tensiunea superficială este mai mică și forțele de coeziune sticlă / plastic scad, în timp ce forța de coeziune lichid-lichid crește.

Din cauza celor de mai sus, alte metode pentru cuantificarea unităților care formează colonii sunt uneori preferate pentru culturile de urină.

Mâner drept sau ac

Se mai numește mâner de ață. Este utilizat pentru a inocula anumite teste biochimice, în special cele care necesită sămânță prin tehnica puncției. Exemplu, medii semi-solide care sunt preparate sub formă de bloc, cum ar fi: SIM, MIO și O / F.

În plus, în cazul MIO și SIM care evaluează motilitatea, este esențial ca puncția să fie efectuată cu o buclă de ac, deoarece interpretarea unei motilități pozitive are loc atunci când bacteriile cresc către părțile laterale ale inoculului inițial.

Un test inoculat cu o buclă de buclă poate falsifica rezultatele (fals pozitiv). Din acest motiv, în acest tip de însămânțare, trebuie avut grijă ca puncția să fie unică și că atunci când este îndepărtată, ea iese în aceeași direcție în care a intrat.

Un alt test care trebuie să fie însămânțat cu ac, deși este pregătit în formă de pană este Kligler. În acest test, nu este recomandat ca oxigenul să pătrundă adânc în agar, deoarece este necesar un mediu sărac în oxigen pentru apariția anumitor reacții chimice. Acest mâner este de asemenea utilizat pentru a atinge o colonie specifică în scopul subculturii.

Mâner spatulat

Majoritatea microorganismelor dau colonii moi, ușor de curățat. Cu toate acestea, există unii agenți microbieni ale căror colonii sunt dure și uscate, de exemplu micobacterii în general și unele fungi. În aceste cazuri este util să folosiți mânerul spatulat.

Mâner în formă de „L”

Utilizarea sa cea mai frecventă este de a cimenta culturile fungice, în special mucegaiurile.

Mâner ascuțit

Este util pentru a lua colonii foarte mici prezente în culturile polimicrobiene, pentru a le putea subcultura.

Tehnici de însămânțare

Video 1

Sterilizarea mânerului de platină

Mânerul trebuie sterilizat înainte și după utilizare. Pentru sterilizarea buclei bacteriologice în bricheta, se procedează astfel: mânerul trebuie plasat în partea superioară a flăcării, adoptând o poziție cât mai verticală posibil, astfel încât să se sterilizeze de la vârf în sus.

Când filamentul fin devine roșu aprins, se poate spune că este steril. Pentru a o folosi, se răcește și se prelevează proba aleasă. (Vezi video 2).

Sterilizarea buclei bacteriologice

Video 2

Referințe

1. „Bucla bacteriologică” Wikipedia, Enciclopedia gratuită. 23 iulie 2019, 13:31 UTC. 18 august 2019, 22:45. Wikipedia.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Mânere metalice calibrate pentru microbiologi: o alternativă a fabricației naționale. Soc. Vino. Microbiol. 2010; 30 (1): 37-42. Disponibil la: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnostic microbiologic Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosticul microbiologic. 5 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, și colab. Determinarea efectului analgezic al extractului de hexan din florile Eupatorium arsenei într-un model de durere acută la șobolani. mex. ştiinţă. fermă. 2015; 46 (1): 64-69. Disponibil pe: scielo.org