BACILLOSCOPIE: PROCEDURĂ, PENTRU CE ESTE ȘI TIPURI - MEDICAMENT - 2025

Frotiu este un instrument de diagnostic pentru tuberculoză pulmonară activă. Este o tehnică de laborator care permite detectarea și măsurarea bacililor cu acid rapid, precum Mycobacterium tuberculosis. Este cea mai utilizată metodă la nivel mondial pentru a face diagnosticul de tuberculoză pulmonară activă în comunitate și pentru a evalua beneficiile tratamentului.

Tuberculoza pulmonară este o boală infecțioasă cauzată de Mycobacterium tuberculosis care infectează plămânii, dar poate afecta alte organe și sisteme. La nivel mondial, peste 6 milioane de oameni suferă de tuberculoză pulmonară (TBC).

Celulele M. tuberculosis într-un frotiu de spută (Sursa: Microrao / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0) prin Wikimedia Commons)

Mycobacterium tuberculosis și alte specii non-tuberculoase Mycobacterium posedă o acoperire lipidică pe peretele celular care este bogat în acid micolic, care este rezistent la decolorarea alcoolului acid după colorarea cu coloranți de bază.

Prin urmare, sunt utilizate metode speciale de colorare, cum ar fi metoda Ziehl-Neelsen. Aceste metode simple și necostisitoare permit peretelui să păstreze pata atunci când proba este clătită cu o soluție acidă, iar peretele Mycobacterium se înroșește în contrast cu alte bacterii care devin albastre.

Pentru a face o microscopie de frotiu, este necesară o probă de spută, de preferință preluată dimineața când te trezești. Se pot utiliza, de asemenea, probe de țesut sau mostre de fluid de corp.

Proces

Probele care urmează să fie prelucrate pentru microscopie cu frotiu sunt probe de spută, probe de țesut sau mostre de lichide corporale. Probele de țesut pot fi extrase prin bronhoscopie sau biopsii ale ganglionilor limfatici sau ale altor țesuturi.

Deoarece tuberculoza poate afecta orice organ sau sistem, probele pot fi foarte variate, inclusiv: probe de urină, lichid cefalorahidian, lichid pleural, lichid ascitic, sânge, puroi din cavitățile deschise, biopsii etc.

Probele de leziune extrapulmonară trebuie, de asemenea, prelucrate pentru cultură. Probele de spută sunt colectate în orele dimineții la creștere.

Mai multe probe pot fi colectate la rând sau în zile consecutive. Probele trebuie etichetate în sticle închise, cu gură largă. Acestea trebuie să conțină datele pacientului, tipul eșantionului și data recoltării probei.

Procedura tehnică

- După obținerea eșantionului, acesta poate fi centrifugat pentru a se concentra sau utiliza direct. Procedura inițială constă în așezarea câtorva picături a eșantionului și întinderea lor pe o lamelă.

- Proba este acoperită cu fuchsin filtrat (soluție de colorare).

- Apoi se încălzește până se obțin aproximativ trei emisiuni de vapori albicioși.

- Așteptați cinci minute pentru ca proba să se răcească și spălați-l cu apă.

- Este acoperit cu soluție de albire (alcool acid) pentru o perioadă de 2 minute.

- Se spală din nou cu apă.

- Proba este acoperită cu albastru de metilen și se lasă să stea timp de un minut.

- Se spală cu apă.

- Lăsați-l să se usuce în aer și continuați la observația de la microscop.

Fotografie de la microscop (Imagine de Konstantin Kolosov la www.pixabay.com)

Această procedură este rapidă, simplă, ieftină și permite celulelor Mycobacterium tuberculosis să se coloreze roșu. Această tehnică se numește tehnica de colorare Ziehl-Neelsen.

Observarea microscopică constă în identificarea prezenței bacililor cu acid rapid și cuantificarea acestora pe câmp.

Celulele tuberculozei Mycobacterium apar sub formă de tije roșii, granulare, curbate, pe un fundal albastru. Pot fi izolate, împerecheate sau grupate. Observarea trebuie făcută pe teren și trebuie examinate cel puțin 100 de câmpuri pentru fiecare frotiu.

Rezultatul este considerat pozitiv atunci când există, în fiecare câmp, mai mult de 10 M. celule tuberculoză. Aceasta corespunde de la 5.000 la 100.000 de bacili pentru fiecare mililitru de probă.

În aceste cazuri, este considerat pozitiv pentru Mycobacterium tuberculosis, deoarece Mycobacterium ne-tuberculoasă sau alte bacterii rezistente la acid au forme diferite și, în general, cantitatea observată pe câmp este mai mică de 10.

Persoana care examinează eșantionul trebuie să aibă experiență sau expertiză în detectarea și recunoașterea acestor microorganisme, deoarece în rezultate pot exista falsuri negative sau fals pozitive.

Există și alte tehnici fluoroscopice care sunt mai sensibile, dar mult mai scumpe. O astfel de tehnică folosește colorarea Auramine-O, pentru a obține o fluorescență verde, sau Auramine O / Rodamina B, pentru a observa o fluorescență galbenă / portocalie.

În general, cazurile pozitive sunt duse în cultură și antibiogramă pentru a confirma diagnosticul și selectarea corespunzătoare a tratamentului.

Pentru ce este vorba de microscopie pentru frotiu?

Tuberculoza este o boală infecțioasă care afectează plămânul și alte organe și sisteme de organe ale corpului. Este o boală contagioasă care produce leziuni grave ale sistemului respirator care, dacă nu este tratată corect, poate provoca moartea pacientului.

Tuberculoza se transmite aproape exclusiv prin picături suspendate în aer din expectorația unui pacient infectat cu tuberculoză pulmonară. Aceste mici picături pot rămâne în aer și au capacitatea de a infecta persoana care le inhalează.

Celule de tuberculoză (Sursa: NIAID / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0) prin Wikimedia Commons)

Infecția necesită timp de contact prelungit cu un pacient infectat, care scuipă continuu bacilii într-un mediu slab ventilat. Persoanele cu imunodeficiențe sunt mai susceptibile să se infecteze.

Pacienții HIV-pozitivi au mai multe șanse decât restul populației să dezvolte infecții respiratorii grave, inclusiv tuberculoza pulmonară. De aici importanța microscopiei de frotiu ca metodă rapidă și ieftină de diagnostic pentru tuberculoză.

Microscopia cu frotiu permite efectuarea unui diagnostic bacteriologic al tuberculozei, cu toate acestea, trebuie confirmat un rezultat pozitiv cu alte studii.

Studiile care confirmă diagnosticul de tuberculoză includ examene radiologice care prezintă imagini caracteristice ale lobilor superiori ai plămânului, teste pozitive de tuberculină și culturi de probe pozitive.

Frotiu negativ

O microscopie cu frotiu negativ nu exclude neapărat diagnosticul de tuberculoză, deoarece mai ales când proba este spută, eliminarea bacililor nu este constantă. Prin urmare, în aceste cazuri, când se suspectează diagnosticul, sunt necesare probe seriale.

Frotiu pozitiv

O microscopie cu frotiu pozitiv este indică tuberculoza și trebuie confirmată cu alte studii complementare. Ori de câte ori rezultatul este pozitiv, trebuie făcută o cultură și antibiogramă.

Odată stabilit tratamentul, o scădere susținută a scării de pozitivitate a microscopiei de frotiu până la obținerea unor rezultate negative, permite controlul beneficiilor tratamentului.

Referințe

1. Aziz, MA (2002). Evaluare externă a calității pentru microscopie cu frotiu AFB.
2. Desikan, P. (2013). Microscopie cu frotiu de spută în tuberculoză: mai este relevantă ?. Revista indiană de cercetare medicală, 137 (3), 442.
3. Fauci, AS, Kasper, DL, Hauser, SL, Jameson, JL și Loscalzo, J. (2012). Principiile lui Harrison în medicina internă (Vol. 2012). DL Longo (Ed.). New York: Mcgraw-hill.
4. Ngabonziza, JCS, Ssengooba, W., Mutua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M., … și Muvunyi, CM (2016). Performanța de diagnostic a microscopiei frotiei și randamentul incremental al Xpert în detectarea tuberculozei pulmonare în Rwanda. Boli infecțioase BMC, 16 (1), 660.
5. Sardiñas, M., García, G., Rosarys, MM, Díaz, R., & Mederos, LM (2016). Importanța controlului calității baciloscopiei în laboratoarele care efectuează diagnosticul de tuberculoză. Revista chiliană de infecție: Organ oficial al Societății chiliene de infecție, 33 (3), 282-286.
6. Sequeira de Latini, MD, & Barrera, L. (2008). Manual pentru diagnosticul bacteriologic al tuberculozei: standarde și ghid tehnic: microscopie frotiu 1 parte. În Manual pentru diagnosticul bacteriologic al tuberculozei: standarde și ghid tehnic: microscopie frotiu 1 parte (pp. 64-64).