- Fundație și materiale
- materiale
- paşi
- Examenul macroscopic și microscopic
- Tehnica originală Faust
- Tehnica Faust prin centrifugare
- Avantaj
- Dezavantaje
- Referințe
Tehnica Faust este o metodologie care permite concentrarea unor ouă și / sau larve de paraziți conținute în fecale de plutitoare. Se utilizează atunci când testele coproparazitologice directe sunt negative sau când doriți să obțineți probe curate, fără detritus.
Metodele de concentrare pentru examinările coproparazitologice sunt de trei tipuri: prin flotare, prin sedimentare sau prin metode care combină cele două anterioare. Aceste metode cresc șansele de rezultate pozitive.
Analiza scaunelor.
Metoda Faust constă în amestecarea unei părți din proba de scaun cu o substanță mai densă decât ouăle sau paraziții care trebuie concentrați. Acest lucru face ca, fiind mai puțin densi, să plutească la suprafață. Lichidul de supernatant este colectat și vizualizat la microscop pentru identificare și cuantificare.
Această metodă este utilizată pentru vizualizarea ouălor de helmint. În același timp, s-a dovedit a fi o metodă foarte sensibilă pentru diagnosticul de Giardia lamblia, un protozoan flagelat, care este răspândit la nivel mondial. Metodele de flotație nu sunt recomandate pentru ouăle de parazit foarte grele, cum ar fi tâmplarii și trematodii.
Paraziții sunt una dintre cele mai răspândite infecții intestinale la nivel mondial, în special în țările sărace cu măsuri sanitare precare. Din acest motiv, existența unor metode sensibile pentru identificarea și cuantificarea acestor paraziți este foarte utilă pentru diagnostic și tratament.
Fundație și materiale
Tehnica se bazează pe existența diferitelor gravitații specifice ale ouălor, paraziților, chisturilor, larvelor și detritusului, folosind soluții de sulfat de zinc ca metodă de flotare.
Motivul din spatele tehnicii este amestecarea eșantionului cu o soluție de sulfat de zinc care are o densitate mai mare decât cea a ouălor mai ușoare, a larvelor sau a paraziților.
Acest lucru permite precipitarea elementelor mai grele și cele mai ușoare să plutească, care apar în supernatant după centrifugarea probelor.
materiale
Containere pentru colectarea probelor fecale (Sursa: Bobjgalindo prin Wikimedia Commons)
- Preparați o soluție de sulfat de zinc cu o densitate de 1,18 sau 1,2 g / ml dacă proba a fost tratată anterior.
- Pregătiți un suport cu eprubete etichetate anterior.
- Aveți o mașină centrifugă.
- Aveți la dispoziție diapozitive și copertine pentru microscop. Toate trebuie să fie etichetate
- Asigurați-vă că o soluție Lugol este disponibilă pentru a colora foile.
- Aveți tifon pentru a filtra.
- Aveți pâlnii și apă distilată.
- Localizați recipiente etichetate din plastic sau carton.
- De asemenea, aplicatoare și mâner steril de 5 mm.
- O brichetă pentru sterilizarea mânerului.
paşi
Examenul macroscopic și microscopic
Pentru orice examen de scaun, examinarea începe cu ceea ce se numește „examinarea brută” a probelor.
Sunt descrise consistența, culoarea, prezența a ceea ce pare a fi sânge, prezența mucusului și prezența paraziților adulți.
Apoi trecem la „examinarea microscopică” a scaunului, aceasta depinde de metodă. Cea mai simplă este metoda frotiei directe, care este cea mai simplă metodă de observare microscopică a paraziților.
Fotografie a observației Gardia lamblia, un parazit intestinal (Sursa: Riddlemaster prin Wikimedia Commons)
Procedura implică plasarea unei cantități mici din eșantion direct pe o lamelă. Puneți câteva picături de soluție salină care ar trebui să aibă dimensiuni similare cu proba. Se amestecă soluția salină cu scaunul până se formează un amestec omogen. Puneți o copertină și examinați la microscop.
Tehnica originală Faust
A doua procedură constă în metoda Faust float, a cărei versiune originală constă din:
1- Plasați aproximativ două grame de fecale într-un recipient potrivit pentru acest scop.
2- Adăugați 30 ml de soluție de flotație de sulfat de zinc cu care se produce o emulsie amestecând soluția cu fecalele.
3- Se strecoară cu o strecurătoare metalică într-un al doilea recipient și se transferă într-o eprubetă.
4- Adăugați mai multă soluție de flotare până când se formează un menisc în tub.
5- Puneți o copertă de sticlă pe menisc. Lasă-l să se odihnească 10 - 15 minute.
6- Îndepărtați capacul și așezați-l pe o lamelă, care va fi examinată la microscop.
Tehnica Faust prin centrifugare
Inițial, metoda nu a folosit centrifugarea, cu toate acestea, acum este inclusă deoarece se obțin rezultate mai bune. Tehnica implică o serie de pași pentru realizarea unei proceduri adecvate, acestea fiind următoarele:
1- Fecalele se spală cu apă, se amestecă bine și apoi se filtrează cu tifon pliat în patru. Proba este plasată într-o eprubetă.
2- Centrifugați și îndepărtați supernatantul (probe care sunt păstrate deasupra apei). Etapele 1 și 2 se repetă până când supernatantul este „clar”.
3- Sulfatul de zinc se adaugă la proba filtrată și centrifugată.
4- Se amestecă bine.
5- Centrifugați din nou timp de 1 minut la 2500 rpm (rotații pe minut).
6- Supernatantul este recuperat cu o buclă sterilă de aproximativ 5 mm; tuburile nu trebuie agitate.
7- Eșantionul recuperat de la supernatant este plasat pe o lamelă și poate fi plasată o picătură de Lugol pentru a colora, capacul este plasat și observat la un microscop.
8- Containerele și epruvele sunt etichetate.
Avantaj
- Elementele utilizate pentru diagnostic pot fi văzute curate și fără „detritus”, acest lucru facilitează observarea foii și reduce timpul utilizat pentru diagnostic.
- La supernatant, se recuperează atât larvele, ouăle și / sau chisturile.
- Este o metodă cu costuri foarte mici.
- Procedura este foarte simplă și ușor de implementat.
- Diagnosticul este rapid și precis.
- Datorită importanței și incidenței ridicate a parazitozei în țările sărace, aceste metode cu costuri reduse și ușor de utilizat sunt ideale pentru diagnosticul și monitorizarea acestor patologii.
Dezavantaje
Densitatea soluției de flotație produce o contracție a larvelor, adică acestea se micșorează și, într-o perioadă foarte scurtă, se pot deforma. Acest lucru îl obligă pe examinator să facă diagnosticul imediat și probele tratate nu pot fi păstrate pentru examene viitoare.
La fel ca în cazul tuturor metodelor de identificare microscopică, un personal de înaltă experiență trebuie să facă diagnostice precise.
Deformarea rapidă a elementelor necesare diagnosticului, deși sunt un dezavantaj evident, poate fi corectată prin efectuarea de observații microscopice imediate.
Referințe
- Ananias, FL (2017). Evaluarea sensibilității metodei Faust și a sedimentării spontane pentru diagnosticul giardiozei. Cuban Journal of Tropical Medicine, 68 (2).
- Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, JW (1978). Evaluarea comparativă a unei tehnici de flotație a sulfatului de zinc modificat. Jurnal de microbiologie clinică, 7 (6), 524-528.
- Becker, AC, Kraemer, A., Epe, C., & Strube, C. (2016). Sensibilitatea și eficiența metodelor coproscopice selectate-sedimentare, sedimentare-flotație combinată cu sulfat de zinc și metoda McMaster. Cercetare de parazitologie, 115 (7), 2581-2587.
- Garcia, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW, … și Visvesvara, G. (2018). Diagnosticul de laborator al paraziților din tractul gastro-intestinal. Recenzii de microbiologie clinică, 31 (1), e00025-17.
- Summers, WA (1942). O modificare a metodei de flotație centrifugală de sulfat de zinc pentru recuperarea ovulelor de helmint în materiile fecale formalizate. Journal of Parasitology, 28 (4), 345-346.