- caracteristici
- preparare
- Aplicații
- Determinarea fosfatazei alcaline
- Determinarea antigenului de prostată (PSA)
- Determinarea activității enzimei arginin kinazei sau a fosfocinazei
- Toxicitate
- În om
- Impact asupra mediului
- Referințe
Timolftaleină este un indicator de pH cu denumirea științifică: 3,3-bis -isobenzofuranone -1 (3H) și formula sa chimică C 28 H 30 O 4 . Este sintetizat din anhidridă ftalică și timol.
Acest indicator de pH are proprietăți foarte deosebite, deoarece la un pH extrem de scăzut este roșu intens (pH <0). Mai târziu, există o gamă largă de pH unde este complet incolor (pH 1 - 9,2), cu o gamă de schimbare între 9,3 și 10,5 unde se poate schimba la albastru, în timp ce peste 10,5 este albastru intens.
Structura chimică a timolftaleinei la pH acid (incolor) și la pH alcalin (albastru profund). Sursa: Dannybalanta /Pxhere.com
Aplicațiile sale includ servirea ca indicator acid-bazic în anumite reacții chimice. De asemenea, este utilizat ca cromogen în unele reacții colorimetrice în care este evaluată activitatea enzimatică. De exemplu, în determinarea fosfatazei alcaline.
În ceea ce privește toxicitatea, este mai puțin dăunătoare decât alți indicatori de pH, fiind clasificată de Asociația Națională pentru Protecția împotriva Incendiilor (NFPA) ca nivel 1 în raport cu efectele sale asupra sănătății; ceea ce înseamnă că nu este cancerigen sau mutagen.
De asemenea, nu are o toxicitate specifică împotriva niciunui organ țintă; adică reprezintă un risc scăzut de agresiune pentru sănătate. Cu toate acestea, contactul direct cu pielea și mucoasa poate provoca o ușoară iritație.
Pe de altă parte, din punct de vedere al inflamabilității, este clasificat ca 1 și din punct de vedere al reactivității ca fiind zero.
caracteristici
Indicatorul de pH timolftaleina în forma sa solidă este o pulbere albă, în stare lichidă este roșu intens la pH mai mic de zero, incolor la pH 1-9.2 și albastru peste 10,5. Masa sa molară este de 430,54 g / mol, cu un punct de topire de (258 ° C), în timp ce punctul de fierbere este cuprins între 248-252 ° C. Densitatea este de 0,92 g / ml la 25 ° C
Este insolubil în apă rece și solubil în etanol. Nu este o substanță explozivă.
Ca precauție, în timpul transportului, depozitarea și manipularea trebuie să fie ferite de oxidanți puternici.
preparare
Timolftaleina indicatoare de pH la o concentrație de 0,1% este utilizată în general pentru analiza volumetrică. Pentru aceasta, procedați după cum urmează:
- Cântărește 100 mg de timolftaleină și se dizolvă în 100 ml alcool etilic 95%.
De asemenea, poate fi pregătit după cum urmează:
- Cântărește 100 mg de timolftaleină și se dizolvă în 60 ml alcool absolut și se adaugă 40 ml apă distilată.
- A se păstra la temperatura camerei (15 - 25 ° C). Este important ca locul de depozitare să fie rece, ventilat și fără umiditate.
Aplicații
Determinarea fosfatazei alcaline
Pentru determinarea acestui test, există o tehnică care se bazează pe acțiunea hidrolitică pe care o are fosfatasa alcalină asupra monofosfatului de timolteină. Dacă este prezentă fosfatază alcalină, ea hidrolizează timolftaleina monofosfat, eliberând timoletaina.
Aceasta produce o tentă albastră la pH alcalin. Activitatea enzimatică a fosfatazei alcaline este direct proporțională cu intensitatea culorii formate. Absorbanța este citită la 590 nm.
Determinarea antigenului de prostată (PSA)
În acest sens, Shao F și colaboratorii în 2018 au dezvoltat o tehnică colorimetrică în care folosesc nanoparticule de silice mezopore care captează molecule de timolftaleină, care sunt puternic legate de prezența feniltrimetiloxilanului.
La rândul lor, aceste nanoparticule au fost acoperite cu polietilenimină (PEI), favorizând legarea anticorpului anti-PSA secundar.
Pe de altă parte, proba pacientului a fost imobilizată pe o placă; iar când PSA prezent este în contact cu nanoparticulele, acesta se va lega de anticorpi. Nanoparticulele care nu se leagă vor fi eliminate.
Ulterior, timolftaleina va fi eliberată ușor prin adăugarea unei soluții alcaline, care generează o nuanță albastră. Gradul de culoare este direct proporțional cu concentrația de PSA.
Determinarea activității enzimei arginin kinazei sau a fosfocinazei
Folosind timolftaleina indicatorului de pH, se poate determina activitatea enzimatică a argininei kinazei. Testul se bazează pe următoarele:
Enzima arginina kinază este o fosfotransferază care participă la formarea fosfoargininei, așa cum este revelată în următoarea reacție chimică:
Sursa: "Arginina kinază." Wikipedia, enciclopedia gratuită. 10 iulie 2018, ora 13:49 UTC. 20 mai 2019, 03:58 wikipedia.org/
Dacă această reacție este efectuată împotriva timolftaleinei indicatorului de pH, este posibilă măsurarea activității enzimei. Acest lucru este posibil conform următoarei explicații: reacția are loc la un pH alcalin, în care timolftaleina își va arăta culoarea albastră.
Activitatea enzimatică se măsoară prin decolorarea culorii reflectată de scăderea absorbției la 575 nm, deoarece pe măsură ce enzima acționează, protonii (H +) sunt eliberați, care acidifică mediul.
Acest lucru face ca timolftaleina să își piardă culoarea odată ce se apropie de zona de cotitură. Dacă pH-ul scade sub 9,2, acesta devine complet incolor.
Prin urmare, intensitatea culorii albastre este invers proporțională cu activitatea enzimei.
Toxicitate
În om
Acest compus este mai puțin toxic decât majoritatea indicatorilor de pH, deoarece până acum nu i se atribuie efecte cancerigene sau mutagene. Cu toate acestea, nu este total inofensiv: la contactul cu pielea și mucoasele poate provoca roșeață în zonele menționate.
De asemenea, poate produce reacții nedorite dacă este ingerat sau inhalat accidental.
În caz de contact direct cu pielea și mucoasele, zona afectată trebuie spălată cu multă apă timp de cel puțin 15 minute. Și dacă observă semne de iritație, ar trebui să meargă la cel mai apropiat centru de asistență medicală.
Acesta este motivul pentru care utilizarea manevrelor de siguranță precum rochia, mănușile și ochelarii de siguranță este recomandată la manipulare.
În ciuda riscului scăzut de inflamabilitate, se recomandă ca pentru prudență să stați departe de brichete.
Impact asupra mediului
În ciuda faptului că este mai puțin toxic pentru sănătatea umană, este toxic în mediile acvatice, afectând organismele găsite acolo. În plus, are o putere mare de bioacumulare, iar pe termen lung este posibil să se formeze produse de degradare dăunătoare mediului.
Prin urmare, trebuie evitat ca acest produs să ajungă la apele de suprafață sau subterane, deoarece ar afecta apa potabilă.
În acest sens, laboratoarele care utilizează acest indicator trebuie să își elimine deșeurile în conformitate cu reglementările în vigoare în fiecare țară.
Referințe
- Pizzani P, Godoy S, León M, Rueda E, Castañeda M, Arias A. Efectul creșterii concentrațiilor de fosfor phytic asupra activității enzimelor fosfatazei alcaline în epiteliul intestinal al oilor tinere. Rev. Cient. (Maracaibo). 2008.18 (1): 59-64. Disponibil pe: scielo.org.
- „Timolftaleină.“ Wikipedia, enciclopedia gratuită. 22 Feb 2019, 04:40 UTC. 19 mai 2019, 22:20, es.wikipedia.org.
- Shao F, Zhang L, Jiao L, Wang X, Miao L, Li H, Zhou F. Testul imunosorbent fără enzime al antigenului specific de prostată amplificat prin eliberarea moleculelor indicatorului de pH înglobate în nanoparticule de silice mezoporoasă. Anal Chem. 2018; 17; 90 (14): 8673-8679.
- Yu Z, Pan J, Zhou HM. Un test continuu direct de spectrofotometric al pH-ului pentru activitatea argininei kinazei. Proteine Pept Lett. 2002; 9 (6): 545-52.
- Scharlau. Fișă tehnică de siguranță a timolftaleinei 2013. Disponibil la adresa: javeriana.edu.co
- Fișă tehnică de siguranță a timolftaleinei FTS. Universitatea Națională din Heredia, Costa Rica. Disponibil în: Thymolphthalein% 20 (3).
- "Arginina kinază." Wikipedia, enciclopedia gratuită. 10 iulie 2018, ora 13:49 UTC. 20 mai 2019, 03:58 ro.wikipedia.org.