CONGO ROȘU: CARACTERISTICI, PREGĂTIRE ȘI APLICAȚII - BIOLOGIE - 2025

Congo roșu este un colorant azoic pentru proteine formate prin cuplarea unei sări de diazoniu și un inel aromatic activ. Această substanță este capabilă să absoarbă radiații electromagnetice în spectrul vizibil, motiv pentru care are o culoare intensă.

Se încarcă negativ. Prin urmare, are o afinitate pentru componentele celulare încărcate pozitiv, cum ar fi anumite substanțe proteice. Culoarea sa variază în funcție de pH. În acest sens, dacă mediul este acid (<decât pH3), culoarea este albastru intens. Între pH3 - pH 5,2 este fucsia (zona de întoarcere), iar cu> pH 5,2 culoarea este roșie profundă.

Soluție coloidală deshidratată Congo Red și Congo Red. Sursa: Pixinio.com și Wikipedia.com

Este o substanță foarte versatilă, deoarece are multiple utilizări. A fost utilizat ca colorant în industria textilă, precum și pentru celule și țesături.

De asemenea, să se realizeze medii de cultură care măsoară acțiunea enzimatică, ca indicator de pH, ca substanță de control în evaluarea funcționării corespunzătoare a spectrofotometrelor, în studiul formării biofilmului sau în diagnosticul amiloidelor.

De asemenea, a făcut posibilă distingerea serotipurilor bacteriene și fungice prin identificarea unor structuri specifice în peretele lor (lipopolizaharide).

Caracteristicile roșului Congo

Această substanță a fost descoperită de Böttiger în 1884. Este un derivat al diazoniului format din acidul bis-diazoic al benzidinei cu acid naftionic. Molecula roșie din Congo măsoară 21 Armstrong, iar greutatea moleculară este de aproximativ 8000 g / mol.

Roșu Congo se caracterizează prin faptul că este solubil în apă și cu atât mai mult în solvenți organici, cum ar fi etanolul, formând o soluție coloidală.

Are o afinitate pentru celuloză, pentru țesutul amiloid și pentru componentele celulare încărcate pozitiv.

preparare

Congo Red este preparat în diferite concentrații în funcție de tehnica utilizată. Majoritatea folosesc roșu Congo la 1%, 2%, 0,1%, printre altele.

De exemplu, pentru a prepara 2% roșu Congo, trebuie cântărit 2 g de colorant alimentar deshidratat și adăugate 100 ml apă distilată. Se păstrează apoi într-o sticlă de chihlimbar.

Aplicații

Ca colorant în industria textilă

Pentru o vreme a fost utilizat pe scară largă în industria textilă datorită fixării sale pe bumbac, dar în prezent este în uz, deoarece este cancerigen și, de asemenea, pentru că culoarea nu este stabilă, devenind decolorată prin frecare.

Determinarea capacității de formare a biofilmului

S-a demonstrat că capacitatea de formare a biofilmului a microorganismelor este un factor de virulență.

În acest sens, colorantul roșu din Congo este utilizat ca metodă pentru determinarea formării biofilmului. Roșul Congo se leagă de exopolizaharidele prezente în biofilm. Cu toate acestea, în comparație cu alte metode, este cel mai puțin recomandat din cauza negativelor false mari care apar.

Metoda folosește agar roșu Congo, acesta este compus din agar din sânge ca bază, glucoză (10 g / l) și colorant roșu Congo (0,4 g / l). Tulpinile care urmează a fi evaluate sunt însămânțate în mediu și incubate timp de 24 de ore la 37 ° C și apoi incubate timp de 48 de ore la temperatura camerei.

Un test pozitiv este evidențiat dacă se observă colonii cristaline de culoare neagră și aspect uscat.

Controlul calității spectrofotometrelor

Pentru a evalua dacă un echipament de măsurare a absorbției sau a tranzacțiilor respectă parametrii fotometrici stabiliți de reglementările internaționale, se poate utiliza o tehnică simplă pentru a stabili dacă echipamentul emite rezultate în limitele acceptabilității.

Una dintre tehnicile de evaluare este utilizarea roșu Congo, bazat pe punctul izosbestic.

Punctul izosbestic este lungimea de undă la care Congo roșu emite aceeași absorbție independent de pH, concentrație și temperatură. Valoarea de absorbție este fixă ​​și poate fi utilizată ca referință.

Punctul teoretic izosbestic de roșu Congo este cunoscut a fi de 541 nm. În cazul în care valoarea obținută este diferită, se știe că echipamentul are probleme în derivă cu lungimea de undă și trebuie verificat de un tehnician specializat.

Pregătirea mediilor de cultură

Ortiz și colab., Descriu un mediu de cultură preparat cu colorant roșu Congo și carboximetilceluloză numit agar CMC, pentru a detecta tulpini microbiene celulite; adică producători de celuloză (endogluconeze, exoglucanaze și ß-glucozidaza).

Acest mediu are o colorare intensă. Culoarea va fi disipată prin acțiunea enzimei endoglucanază care rupe structura carboximetilcelulozei. Acest lucru sugerează o reacție pozitivă.

Scăderea vâscozității și absorbanței permite cuantificarea activității enzimei. De exemplu, în tulpinile Streptomyces sp.

Identificarea microorganismelor

Congo roșu are o afinitate pentru structurile polizaharidice ale anumitor tulpini, realizând astfel identificarea acestor microorganisme. Printre ele se numără Escherichia coli și Shigella flexneri.

Plăcile de agar roșu din Congo sunt, de asemenea, utilizate pentru a obține colonii caracteristice, cum este cazul Azospirillum sp, care dă coloniile roșii scarlatine, printre altele.

Pata de celule și țesuturi

Una dintre cele mai frecvente aplicații de roșu Congo este utilitatea sa în diagnosticul amiloidozei. Această boală ciudată constă în acumularea extracelulară a unei proteine ​​anormale în diferite organe. Această proteină anormală este fabricată în măduva osoasă și se numește amiloid.

Congo roșu are o afinitate ridicată pentru această substanță. Această proprietate a fost utilizată pentru a-și arăta prezența în secțiuni histologice de țesut. Congo Red este utilizat împreună cu Hematoxylin / Eosin în acest scop.

Unirea țesutului amiloid și roșu Congo are loc prin legături de hidrogen non-polare, între grupările carboxil și grupul amino. Proteina amiloidă asigură grupările carboxilice (COOH) și grupul amino roșu al Congoului.

Țesutul amiloid este colorat în diverse nuanțe, de la roz până la roșu profund atunci când este văzut la microscopul luminos. La microscopurile cu lumină dublă polarizată, aceste preparate sunt observate cu o birefringență verde-mere patognomonică.

Adică, prezintă dicroism, deoarece fibrele amiloide sunt anisotrope. Această observație confirmă diagnosticul.

Colorarea țesuturilor cu roșu Congo este compatibilă cu alte metodologii de diagnostic, cum ar fi metodele imunocitochimice, putând fi chiar amintită.

Ca indicator de pH

Proprietatea de a se îndrepta împotriva modificărilor de pH este folosită de tehnica numită cromoendoscopie.

Această tehnică folosește coloranți și indicatori de pH care permit detectarea anumitor patologii. Printre ele se numără utilizarea roșu Congo, care poate dezvălui focare precoce de cancer în mucoasa gastrică, fiind folosit ca marker al acidității.

Tehnica se bazează pe faptul că roșu de Congo la pH acid este negru. Prin urmare, după plasarea unei soluții de roșu Congo pe mucoasa gastrică, zonele în care există paloare vor fi alese pentru a preleva proba pentru biopsie, adică acolo unde nu există producție de acid. Acest lucru sugerează prezența unui focar canceros sau pierderea celulelor parietale.

Referințe

1. „Congo Red”. Wikipedia, enciclopedia gratuită. 8 mai 2019, ora 12:13 UTC. 16 mai 2019, 04:08, es.wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Nouă metodă pentru cuantificarea activității endoglucanazei bazată pe complexul roșu celuloză-Congo. Orinoquia. 2011 iunie; 15 (1): 7-15. Disponibil de pe: scielo.org.
3. Peña J, Uffo O. Producția de biofilm în genotipuri de Staphylococcus aureus izolat de mastita bovină din Cuba. Rev Salud Anim. . 2013 Dec; 35 (3): 189-196. Disponibil la adresa: scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G și colab. Manifestări cutanate ale amiloidozei sistemice ca cheie de diagnostic: caz clinic. Rev. medic. Chile. 2012 Apr; 140 (4): 499-502. Disponibil în: scielo.
5. Duymovich C, Acheme R, Sesini S, Mazziotta D. Spectrofotometre și fotocolorimetri Ghid practic de actualizare. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 2005, 39 (septembrie-decembrie): Disponibil la: redalyc.org
6. Marín J, Díaz J și Solís J. Cromoendoscopia în infecția cu Helicobacter pylori: este timpul de reacție? Rev Esp Enferm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Chimie organică. Editorial Reverté. Barcelona, ​​Spania. Disponibil la adresa: books.google.co.ve
8. Murillo M. Tehnici de colorare a țesuturilor histologice. Universitatea din Guadalajara, Mexic. Disponibil la adresa: academia.edu
9. Paillié M. Determinarea activității celulolitice, ligninolitice și amilolitice a Actinobacteriilor izolate din solul rizospferic al trifoiului alb (Trifolium repens). 2012. Pontificia Universidad Javeriana Facultatea de Științe Microbiologie industrială Bogotá DC Disponibil la: repository.javeriana.edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R, & Baldani V. Izolarea și identificarea Azospirillum sp. pe iarba Guinea (Panicum maximum Jacq.) din Valea Cesar. Pastures and Forages, 2010; 33 (3): 1-8 Disponibil în: scielo.