TESTELE BIOCHIMICE: TIPURI, PENTRU CE SUNT ELE ȘI PENTRU IMPORTANȚĂ - BIOLOGIE - 2025

De Testele biochimice in microbiologie sunt un set de produse chimice de testare sunt transportate la microorganismele prezent într - o probă pentru a identifica ei ; Aceste microorganisme sunt de obicei bacterii. Există un număr mare de teste biochimice disponibile pentru un microbiolog.

Totuși, alegerea acestor teste se bazează pe constatări preliminare, cum ar fi modelul de pată Gram și trăsăturile de creștere, care permit alocarea bacteriilor la o anumită categorie. Testele biochimice se bazează în principal pe proprietățile metabolice ale fiecărui tip de bacterii.

Nu toate bacteriile au aceleași proprietăți, astfel încât este investigată dacă dețin o anumită enzimă adăugând substratul și așteptând reacția. În mod obișnuit, această determinare este dată de o schimbare de culoare sau de pH în mediul de cultură.

Mai puțin de 15 teste biochimice sunt deseori necesare pentru identificarea fiabilă a unei bacterii până la nivelul speciei. Efectuarea mai multor teste biochimice poate crește încrederea în identificare.

Majoritatea acestor teste biochimice sunt efectuate pe ser sau plasma sanguină. Cu toate acestea, ele pot fi efectuate și pe alte secreții biologice, cum ar fi: urină, lichid cefalorahidian, lichid pleural și fecale, printre altele.

Clasificare

Testele biochimice pot fi clasificate în 3 grupe:

universal

Sunt testele care pot fi efectuate pe orice eșantion și care ghidează microbiologul în următoarele teste biochimice care trebuie efectuate pentru a obține o identificare fiabilă.

Exemplu

Testul catalazei și oxidazei.

diferenţialele

Sunt testele efectuate pentru identificarea microorganismelor prezente în eșantion până la nivelul speciilor.

Identificarea se face pe baza rezultatelor unei combinații de teste, deoarece rezultatele individuale nu sunt suficient de informative pentru a face identificarea.

Exemplu

Testele IMViC și testele de utilizare a zahărului.

Specific

Sunt teste specifice pentru un anumit set de specii sau pentru subtiparea unei specii. Aceste teste sunt, în general, făcute pentru a confirma sau identifica la nivel de subspecie. Testele individuale sunt informative în sine.

Exemplu

Testul γ-Glutamil aminopeptidazei.

Tipuri de teste biochimice

Testul catalazei

Testul catalazei este un test care demonstrează prezența enzimei catalază prin descompunerea peroxidului de hidrogen în oxigen și apă. O cantitate mică de bacterii este adăugată la o picătură de peroxid de hidrogen (3%) pe lamelă.

Testul catalazei este un test simplu utilizat de microbiologi pentru a ajuta la identificarea speciilor de bacterii și pentru a determina capacitatea unor microbi de a descompune peroxidul de hidrogen prin producerea enzimei catalază.

Dacă se observă bule de oxigen, înseamnă că bacteriile au enzima catalază, deoarece catalizează descompunerea peroxidului de hidrogen în oxigen și apă. Se spune că organismul este catalaz pozitiv (de exemplu, Staphylococcus aureus).

Testul oxidazei

Acest test este utilizat pentru a identifica microorganisme care conțin enzima citocrom oxidaza (important în lanțul de transport al electronilor). Este frecvent utilizat pentru a distinge între familiile Enterobacteriaceae și Pseudomadaceae.

Citocrom oxidaza transferă electronii din lanțul de transport al electronilor în oxigen (acceptorul final al electronilor) și îl reduce la apă. Molecul donator de electroni și moleculele acceptante sunt furnizate în testul oxidazei.

Când donatorul de electroni este oxidat prin acțiunea citocromoxidazei, mediul devine violet închis și este considerat un rezultat pozitiv. Microorganismul Pseudomonas aeruginosa este un exemplu de bacterie pozitivă oxidază.

Test de agat de manitol sărat (MSA)

Acest tip de test este selectiv și diferențial. MSA va selecta organismele capabile să trăiască în medii cu concentrații mari de sare, cum ar fi speciile de stafilococ în contrast cu speciile de Streptococcus, a căror creștere este inhibată în aceste condiții.

Componenta diferențială din acest test este zahărul de manitol. Organismele capabile să utilizeze manitolul ca sursă de hrană vor produce produse secundare ale fermentației, care sunt acide și astfel scad pH-ul mediului.

Aciditatea mediului determină ca indicatorul de pH, roșu fenol, să devină galben. Exemple de specii de bacterii care pot fi diferențiate prin această metodă sunt: ​​Staphylococcus aureus (pozitiv, deoarece fermentează manitolul) și Staphylococcus epidermidis (negativ, deoarece nu fermentează manitolul).

Test de coagulază

Coagulaza este o enzimă care ajută la formarea cheagului de plasmă din sânge. Acest test este efectuat pe specii de bacterii Gram pozitive și catalaz pozitive pentru a identifica Staphylococcus aureus (pozitiv coagulază). De fapt, coagulaza este un factor de virulență al acestei specii bacteriene.

Formarea cheagului în jurul unei infecții cauzate de această bacterie o protejează probabil de fagocitoză. Acest test este foarte util atunci când doriți să diferențiați Staphylococcus aureus de alte specii de stafilococ care sunt coagulase negative.

Testul de urează

Acest test este utilizat pentru a identifica bacteriile capabile să hidrolizeze urea, folosind ureza enzimelor. Este frecvent utilizat pentru a distinge genul Proteus de alte bacterii enterice.

Hidroliza ureei produce amoniac ca unul dintre produsele sale. Această bază slabă crește pH-ul mediului peste 8,4 și indicatorul de pH (roșu de fenol) se schimbă de la galben la roz. Un exemplu de bacterie urează pozitivă este Proteus mirabilis.

Pentru ce sunt testele biochimice?

Testele biochimice în microbiologie sunt utilizate pentru diagnosticarea bolilor cauzate de microbi și pentru monitorizarea tratamentelor administrate pentru combaterea acestora. În plus, sunt utilizate pentru screeningul bolilor infecțioase și pentru prognosticul acestora.

Identificarea biochimică a microorganismelor oferă o idee despre ce sunt capabile aceste microorganisme, fiind posibilă discriminarea diferitelor tulpini ale aceleiași specii prin profiluri biochimice specifice.

Diferențele în activitățile specifice ale enzimelor informează ecologia, fiziologia sau habitatul natural al microorganismului, care în unele cazuri pot fi considerate informații importante.

Importanţă

Diferențele structurale în forma, dimensiunea și aranjarea bacteriilor ajută puțin în procesul de identificare, deoarece există multe specii de bacterii care sunt similare ca formă, dimensiune și aranjament.

Din acest motiv, identificarea bacteriilor se bazează în cele din urmă în principal pe diferențe în activitățile lor biochimice.

Fiecare specie de bacterii are un set bine definit de activități metabolice diferite de toate celelalte specii. Aceste „amprente” biochimice sunt proprietăți controlate de enzime bacteriene.

Astfel, testele biochimice sunt importante, deoarece ajută cercetătorul să identifice corect agenții patogeni prezenți într-un eșantion și, în acest fel, să poată recomanda pacientului tratamentul adecvat.

Referințe

1. Beckett, G., Walker, S. și Rae, P. (2010). Biochimie clinică (ediția a VIII-a). Wiley-Blackwell.
2. Clarke, PH, & Cowan, ST (1952). Metode biochimice pentru bacteriologie. Journal of General Microbiology, 6 (1952), 187-197.
3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. și O'Reilly, J. (2013). Biochimie clinică (ediția a 5-a). Științele sănătății Elsevier
4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Manual practic de microbiologie (ediția a II-a). CRC Press.
5. Harrigan, W. (1998). Metode de laborator în microbiologia alimentară (ediția a 3-a). Presă academică.
6. Vasanthakumari, R. (2009). Microbiologie practică. Publicatii BI Pvt Ltd.