Agar Salmonella Shigella , de asemenea , cunoscut sub numele de SS agar este selectiv și mediu diferențiat moderat, în special concepute pentru izolarea bacteriilor enteropatogene din genurile Salmonella și Shigella, ambele probe de mediu , cum ar fi clinice.
Agar SS are o compoziție complexă; Este format din extract de carne, peptonă, lactoză, săruri biliare, citrat de sodiu, tiosulfat de sodiu, citrat feric, agar, roșu neutru, verde strălucitor și apă distilată. Având în vedere marea sa selectivitate, se pot semăna probe cu floare mixtă abundentă.
Agar SS cu colonii de Salmonella sp. Sursa: Manurx27, de la Wikimedia Commons
În laboratoarele de microbiologie, mediul Salmonella-Shigella este utilizat pe scară largă pentru a investiga prezența Salmonella și Shigella în probe de scaune diareice, canalizare, apă potabilă și alimente.
Uneori este necesar să folosiți bulion de pre-îmbogățire (bulion de lactoză) și bulion de îmbogățire (bulion de cistină selenită) pentru a recupera tulpinile de Salmonella.
Acești pași sunt necesari atunci când este suspectată existența Salmonellei în cantitate foarte mică sau când tulpina poate fi abuzată de procese tipice producției industriale, în principal alimente procesate. De asemenea, este recomandabil să îmbogățiți mostrele de scaun de la pacienții care au fost tratați cu antibiotice.
Ulterior, bulionul îmbogățit poate fi însămânțat pe agar de Salmonella-Shigella și alte medii similare, cum ar fi agar de xiloză, dezoxicolat de lizină (XLD) și agar de Hektoen enteric (HE).
Bază
Fiecare componentă a mediului de cultură Salmonella-Shigella are o funcție specifică, iar amestecul în ansamblu îi conferă proprietățile care îl caracterizează.
Putere hrănitoare
Extractul de carne și peptona (digerate cu cazeină și țesut animal) asigură nutrienții necesari (nitrogeni, carbon și vitamine) pentru dezvoltarea microorganismelor capabile să tolereze restul componentelor.
consecvență
Agar-agar este responsabil pentru asigurarea consistenței solide a mediului.
Selectiv
Acest mediu este foarte selectiv, deoarece conține săruri biliare, citrat de sodiu și verde strălucitor. Prin urmare, inhibă creșterea tuturor bacteriilor Gram pozitive și a majorității bacililor Gram negativi, inclusiv a unor coliforme.
În timp ce bacteriile din genul Salmonella și unele tulpini de Shigella susțin acești compuși.
În principal, genul Salmonella este foarte rezistent la sărurile biliare, atât de mult încât sunt capabili să trăiască în vezica biliară a unor pacienți purtători care vărsă constant bacteriile din scaunele lor.
Diferenţial
Lactoza este carbohidratul fermentabil care ajută la diferențierea tulpinilor care fermentează lactoza de cele care nu fermentează. Această proprietate este evidențiată de prezența indicatorului de pH, care în acest mediu este roșu de fenol.
Tulpinile care fermentează lactoza dau colonii roșii, în timp ce tulpinile care nu fermentează sunt incolore. Această caracteristică este importantă, deoarece Salmonella și Shigella nu fermentează lactoza.
Pe de altă parte, acest mediu conține tiosulfat de sodiu ca sursă de sulfură și citrat feric ca sursă de fier. Ambii compuși sunt capabili să diferențieze bacteriile capabile să producă hidrogen sulfurat. Acestea reacționează pentru a forma un precipitat de sulfură ferrică neagră vizibilă, insolubilă.
Această proprietate se găsește în unele tulpini din genul Salmonella. În mod normal, coloniile lor sunt plate incolore, cu un punct negru în centrul acesteia. Restul salmoneloze nu produc H 2 S și dezvolta colonii incolore.
Pe de altă parte, coloniile din genul Shigella sunt plate incolore, fără a înnegri.
preparare
Acest mediu este foarte simplu de preparat.
Se cântărește 63 g de mediu comercial deshidratat și se dizolvă într-un litru de apă distilată. Se încălzește soluția și se agită. Amestecul poate fierbe până la minute.
Acest mediu nu trebuie autorizat. După dizolvare, se servește direct pe plăci sterile simple sau duble.
Când se solidifică, sunt aranjate într-un mod inversat pe trombocite și păstrate la frigider (2-8 ° C) până la utilizare.
Mediul după preparare trebuie să rămână la pH 7,2 ± 0,2 și cu o culoare roșu-portocaliu.
Este important să permiteți plăcile să se încălzească înainte de a semăna probele. Eșantionul original poate fi semănat direct, descărcând material pe o parte a agarului și apoi strecurând de acolo.
În cazul în care folosiți bulionuri îmbogățite, treceți o porție din bulionul de selenit și semănați cu o spatulă drigalski.
Se incubează la 37 ° C timp de 24 de ore în aerobioză.
Rețineți că numărul de grame care trebuie cântărit și pH-ul final al mediului poate varia de la o casă comercială la alta. Baza de mijloc aduce întotdeauna indicațiile pentru pregătirea sa.
Utilizare
Este frecvent utilizat în analiza culturii scaunelor și în studiul microbiologic al apelor uzate, apei potabile și probelor alimentare.
Se prepară frecvent plăci duble, pe o parte se pune agar Salmonella-Shigella și pe cealaltă agar XLD.
limitări
-Unele tulpini de Shigella nu cresc în acest mediu. Prin urmare, nu este recomandat pentru izolarea primară a acestui gen.
-Nicio colonie transparentă cu un centru negru nu indică Salmonella; Testele biochimice trebuie efectuate pentru a face o identificare corectă, deoarece coloniile unor tulpini de Proteus sunt indistinguibile față de cele ale Salmonella.
-Mediul deshidratat trebuie să aibă grijă de expunerea la mediu, deoarece este foarte higroscopic. Prin urmare, trebuie păstrat într-un mediu uscat și bine închis. Deschis pentru perioade foarte scurte.
-În timp, sărurile biliare din mediu pot precipita, formând o imagine similară cu o mată în interiorul agarului, dar acest lucru nu afectează rezultatele.
-Unele tulpini de Shigella pot fermenta lent lactoza.
QA
Pentru a dovedi că mediul funcționează corect, este indicat să plantați tulpini de control cunoscute sau certificate și să observați dacă creșterea respectă caracteristicile așteptate.
Pentru aceasta se pot folosi tulpini de E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium sau Enterococcus faecalis.
Rezultatele așteptate sunt:
Enterobacter și Klebsiella ------ colonii mari și mucoizi roșii sau roz.
Shigella flexneri ---------- colonii plate transparente sau incolore.
Salmonella typhimurium ------ colonii incolore cu centre negre.
Enterococcus faecalis -------- inhibare totală.
Referințe
- Laboratoare Difco Francisco Soria Melguizo. Agmon Salmonella-Shigella. 2009. Disponibil la adresa: f-soria.es
- Laborator BD. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Disponibil la adresa: bd.com
- Laboratoarele Britannia. Salmonella-Shigella Agar. 2015. Disponibil la adresa: britanialab.com
- Diagnosticul Valtek. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar). 2010. Disponibil pe: andinamedica.com
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnostic microbiologic Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosticul microbiologic. 5 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.