TESTELE ÎNCRUCIȘATE: PENTRU CE SUNT ACESTEA, TEHNICA, RAȚIONAMENTUL, FAZELE - MEDICAMENT

Crossmatch sunt o serie de studii de laborator sunt efectuate pentru a determina dacă produsele din sânge de la un donator ( în principal , sânge integral și globulare ambalate) sunt compatibile cu sângele primitorului.

Este un test suplimentar pentru compatibilitatea ABO și factorul Rh. Motivul încrucișării este că uneori doi indivizi (donator-beneficiar) pot avea același grup ABO și Rh, dar totuși sângele lor este incompatibil.

Sursa: unsplash.com

O astfel de incompatibilitate se datorează prezenței anticorpilor împotriva unei serii de proteine ale globulelor roșii cunoscute sub numele de antigene minore. Acești antigeni nu sunt testați de rutină, ci sunt pentru grupul sanguin (ABO) și factorul Rh.

Acest lucru se datorează faptului că antigenele minore sunt mult mai puțin frecvente și au o expresie variabilă la fiecare individ, de aceea este practic imposibil să le grupezi în categorii, așa cum se face cu grupul și factorul Rh.

În schimb, globulele roșii ale donatorului sunt amestecate cu serul pacientului (test de potrivire majoră) și celulele roșii ale pacientului cu serul donator (test de potrivire minoră) pentru a detecta prezența reacțiilor antigen-anticorp.

Atunci când există anticorpi împotriva antigenelor minore, fie în serul pacientului sau al donatorului, se spune că testul este pozitiv, deci în majoritatea cazurilor acea unitate de sânge nu poate fi transfuzată.

Grupul ABO

Pentru a înțelege pe deplin despre reacțiile încrucișate, trebuie să știți mai întâi elementele de bază ale grupelor de sânge.

În acest sens, cel mai important este să știi că sângele poate fi clasificat în patru grupe: A, B, AB și O.

Fiecare dintre aceste grupuri exprimă o anumită proteină (antigen) pe suprafața globulelor roșii, care este identificată ca un element străin de anticorpii unui potențial receptor al unei grupări diferite.

Cel mai izbitor despre reacțiile antigen-anticorp în potrivirea sângelui este că nu este necesară expunerea anterioară la antigen pentru a exista anticorpi. Acesta este cunoscut sub numele de anticorpi naturali.

Anticorpi naturali

În general, pentru ca anticorpii să existe în corpul unui individ, este necesar ca celulele albe din sânge ale individului să fi fost expuse anterior la antigen.

Aceasta înseamnă că în primul contact între antigenul străin și organism, nu există anticorpi, deoarece aceștia sunt generați mai târziu, după contactul inițial. Prin urmare, este imposibil ca sistemul imunitar să aibă anticorpi împotriva, de exemplu, cu un anumit virus, dacă nu a fost expus la el în trecut.

Singura excepție de la cele de mai sus sunt antigenele anti-AB. În aceste cazuri, persoana are anticorpi împotriva antigenului pe care globulele roșii nu le au, chiar dacă nu au fost niciodată în contact cu globulele roșii ale altei persoane. Acesta este cunoscut sub numele de anticorpi naturali.

Antigene și anticorpi legați de grupa sanguină

Grupurile de sânge sunt determinate în cazul sistemului ABO prin prezența de antigene specifice (A sau B) pe membrana globulelor roșii și, în schimb, anticorpi împotriva antigenului absent de pe membrana eritrocitară.

Astfel, o persoană cu grupa sanguină A exprimă antigenul A pe suprafața celulelor roșii ale sângelui, în timp ce există anticorpi anti-B în ser.

Dimpotrivă, la pacienții din grupa B antigenul B se găsește în timp ce anticorpii sunt anti-A.

Cu toate acestea, pacienții cu sânge AB au antigeni atât A cât și B. Prin urmare, nu există anticorpi, deoarece acest lucru ar distruge globulele roșii ale acelei persoane.

Dimpotrivă, apare grupul O, unde membrana eritrocitară nu prezintă niciunul dintre cei doi antigeni (nici A, nici B), în timp ce în ser există anticorpi anti-A și anti-B.

Incompatibilitatea grupului ABO

Din cele de mai sus, se poate deduce cu ușurință compatibilitatea grupelor de sânge ABO, deoarece cunoscând antigenul membranei eritrocitare, anticorpii din ser sunt cunoscuți automat. Astfel încât:

- Sângele A este compatibil cu grupa A și grupa O.

- Grupul sanguin B este compatibil cu sângele B și O.

- Persoanele cu grupa O pot primi doar sânge O (deoarece au anticorpi anti-A și anti-B), deși sângele lor este primit de toate celelalte grupuri fără probleme, deoarece îi lipsește antigene.

- In cele din urma. cei care au grupa sanguină AB pot primi sânge de la toate celelalte grupuri (A, B, O și, desigur, AB), deoarece nu au anticorpi împotriva niciunui antigen. Cu toate acestea, doar persoanele din grupul AB pot primi sânge AB, deoarece toate celelalte grupuri au anticorpi care ar distruge aceste globule roșii.

Antigene minore

Ca și în cazul grupărilor ABO, o serie de proteine pot fi găsite pe suprafața eritrocitelor care funcționează ca antigene în același mod ca antigenele grupului ABO.

Cu toate acestea, acești antigeni nu sunt prezenți la toți indivizii. Combinația lor este eterogenă, iar penetranța (nivelul de exprimare a proteinelor) este variabilă, de aceea o clasificare în grupuri precum cea care există pentru ABO și Rh este imposibilă. Aici își derivă numele de la „antigene minore”, cunoscute și sub denumirea de „antigene cu incidență scăzută”.

Deși nu sunt frecvente, pot exista anticorpi naturali împotriva antigenelor minore. Printre ele cele mai frecvente sunt Lewis, MNS, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb și Kidd. Toți aceștia sunt responsabili de reacții hemolitice foarte grave și post-transfuzie.

În plus, poate exista cazul de sensibilizare împotriva antigenelor minore prin contact anterior, fie cu proteine antigenice menționate din cauza transfuziilor anterioare, fie datorită imunității încrucișate.

Imunitate încrucișată

Se spune că există imunitate încrucișată atunci când doi antigeni din două surse diferite (de exemplu, o globulă roșie și o bacterie) sunt foarte asemănătoare, până la punctul în care anticorpii împotriva uneia dintre aceste proteine antigenice reacționează, de asemenea, cu cealaltă, deoarece sunt aproape identici .

Pentru a înțelege mai bine acest lucru, luați exemplul ipotetic anterior (antigene dintr-o celulă roșie din sânge și o bacterie). În niciun caz nu există anticorpi naturali, dar dacă o persoană este expusă bacteriilor, acestea vor genera anticorpi împotriva acesteia.

Astfel de anticorpi vor reacționa mai târziu împotriva unei celule roșii din sânge dacă antigenele sale sunt foarte similare cu cele ale bacteriilor care au indus anticorpii să se formeze.

Dacă se întâmplă acest lucru, celulele roșii cu acea proteină antigenică particulară nu pot fi administrate persoanei care are anticorpii, deoarece ar exista o respingere. Aici se află importanța reacțiilor încrucișate.

Pentru ce se combină?

Întrucât este imposibil să grupezi sângele diferitelor persoane pe baza antigenelor minore, singura modalitate de a ști dacă există antigene minore ale globulelor roșii ale altei persoane în sângele unei persoane este prin încrucișare. .

În acele cazuri în care sunt prezenți anticorpi, se declanșează o reacție de hemoliză sau aglutinare, motiv pentru care se concluzionează că reacția a fost pozitivă; adică există anticorpi împotriva antigenelor minore (deși nu se știe exact care dintre ele). În caz contrar, testul este negativ.

Bază

Încrucișările se bazează pe reacția antigen-anticorp. Prin urmare, cu aceștia este posibil să detectăm dacă în serul unui destinatar există anticorpi împotriva antigenelor globulelor roșii ale donatorului (sau invers), inducând o reacție antigen-anticorp.

Dacă nu există anticorpi, nu are loc nici o reacție și testul este raportat negativ. Dimpotrivă, dacă reacția este pozitivă (există hemoliză sau aglutinare în timpul testului), se poate concluziona că anticorpii sunt prezenți.

În acest sens, este important de menționat că pot exista anticorpi împotriva globulelor roșii atât în serul donator, cât și în beneficiar. Acesta este motivul pentru care există două tipuri de reacții încrucișate.

Tipuri de reacții încrucișate

Anticorpii împotriva eritrocitelor donatoare pot exista în serul pacientului; dar poate să apară și contrariul, adică anticorpi din serul donatorului împotriva globulelor roșii ale pacientului.

De aceea, există două tipuri de crossmatch:

- Cruce majoră.

- Minimă încrucișare.

Ambele tipuri sunt efectuate în mod obișnuit în banca de sânge înainte de a transfunda produse de sânge, deoarece dacă oricare dintre teste sunt pozitive, există un risc ridicat de reacții transfuzionale care pot pune în pericol viața pacientului.

Cruce majoră

Acest test evaluează dacă serul destinatarului conține anticorpi pentru celulele roșii ale sângelui donatorului.

Dacă se întâmplă acest lucru, produsele din sânge nu pot fi administrate, deoarece o cantitate mare de anticorpi prezenți în plasma pacientului vor distruge foarte repede globulele roșii ale donatorului, generând reacții catastrofale în corpul destinatarului. Aceste reacții sunt atât de severe încât pot pune viața în pericol.

Încrucișare minoră

În acest caz, se determină dacă în serul donatorului există anticorpi împotriva globulelor roșii ale receptorului.

Dacă da, anticorpii vor începe să distrugă eritrocitele destinatarului. Cu toate acestea, având în vedere că cantitatea de anticorpi este limitată, reacția este mai puțin intensă; deși este încă periculos.

faze

Atât încrucișarea majoră, cât și cea minoră se împart în trei faze:

- soluție salină.

- Termice sau de incubație.

- Coombe.

În prima fază, globulele roșii și serul sunt amestecate în soluție salină. Ulterior, se adaugă albumină și proba este incubată la 37 ° C timp de 30 de minute pentru a continua în sfârșit faza coombs.

Tehnică

Tehnica crossmatch-ului este relativ simplă, deoarece implică adăugarea de celule roșii ale sângelui donator la serul pacientului (crossmatch major), precum și eritrocitele primitoare la serul donator (minusculă).

Pentru a induce reacția antigen-anticorp într-un timp relativ scurt, trebuie urmate o serie de etape standardizate. Acești pași sunt rezumați într-un mod simplificat mai jos.

Este important de menționat că următoarea secțiune descrie testul de compatibilitate majoră, deși pașii sunt identici pentru testul de compatibilitate minoră, dar schimbând originea globulelor roșii și a serului.

Faza salină

- Adăugați într-o eprubetă 2 picături de ser de la destinatar (de la donator, dacă este vorba despre minusculă încrucișare).

- Ia un eșantion de celule roșii din sânge de la donator (de la destinatar, dacă este vorba despre minusculă încrucișare).

- Spălați și centrifugați globulele roșii.

- Resuspend într-o soluție între 3% și 5%.

- Puneți o picătură din această soluție în tubul care conține serul destinatarului.

- Amestecați ușor.

- Centrifugă.

- Citiți rezultatul în lampa de afișare.

Faza termică

- Adăugați 2 picături de albumină 22% în tubul în care s-a finalizat faza salină.

- Se incubează la 37ºC timp de 30 minute.

- Centrifugați timp de 15 secunde.

- Citiți rezultatul în lampa de afișare.

Faza de coombe

- Luați celulele din tub și spălați-le cu soluție salină.

- Eliminați supernatantul.

- Adăugați două picături de reactiv Coombs.