MEDIU STUART: FUNDAMENT, PREGĂTIRE ȘI UTILIZĂRI - BIOLOGIE - 2025

Medie Stuart este un agar semisolid sau bulion fără substanțe nutritive, utilizat pentru transportul probelor biologice. Scopul său este de a menține tulpinile prezente în eșantion viabile pentru un anumit timp, dar fără a crește populația microbiană.

A fost creat de Moffet, Young și Stuart în 1948 și ulterior modificat de Toshach și Patsula. Este compus din glicerofosfat de sodiu, tioglicolat de sodiu, clorură de calciu și agar-agar. Acesta din urmă este prezent în mediu semi-solid și absent în lichid. Unele laboratoare adaugă albastru de metilen la acesta.

Culturita cu transport Stuart. Sursa: De: CDC / Dr. Gilda Jones, curtoazie: Public Health Image Library

În general, sunt utilizate atunci când nu este posibil să semănați imediat eșantionul. În acest caz, eșantionul este plasat în mediul de transport, în timp ce este transferat la laboratorul care va prelucra cultura.

În acest fel, se garantează faptul că microorganismele prezente rămân vii până când sunt inoculate în mediile de cultură corespunzătoare.

Inițial, utilizarea sa a fost destinată transportului probelor uretrale sau vaginale, unde se suspecta prezența Neisseria gonorrhoeae. Ulterior, și-au dat seama că utilitatea sa ar putea fi mai largă.

Mediul Stuart s-a dovedit a fi foarte eficient în conservarea microorganismelor labile și fastidioase precum Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis, printre altele. Pe lângă alte microorganisme care nu sunt enervante, cum ar fi Enterobacteria.

Mediul Stuart previne practic desicarea eșantionului, menține echilibrul osmotic și păstrează microorganismele la un pH ideal. Pe de altă parte, strategic, acest mediu nu conține substanțe nutritive, împiedicând astfel înmulțirea microorganismelor.

Pe piață există dispozitive speciale de transport pentru eșantion care conțin acest sau alt mijloc de transport, numit culturette. De asemenea, pot fi preparate în laborator.

Bază

Scopul modului de transport Stuart este de a menține eșantioanele cât mai aproape de starea inițială până la prelucrarea lor.

Glicerofosfat de sodiu și clorură de calciu este un sistem tampon care funcționează prin menținerea pH-ului și a osmolarității.

În timp ce tioglicolatul de sodiu acționează ca un agent reducător și, în cazul conținerii de agar, aceasta îi conferă o consistență semi-solidă, pentru a întârzia oxigenarea mediului. În cele din urmă, albastrul de metilen este un indicator de oxidare, adică detectează prezența oxigenului.

Mediul semi-solid cu indicator redox este ideal pentru transportul probelor în care este suspectată prezența bacteriilor anaerobe.

Caracteristicile mijloacelor de transport

Mediul Stuart, la fel ca toate mijloacele de transport, îndeplinește anumite caracteristici, inclusiv:

-Preține tulpini microbiene viabile prezente fără înmulțire.

-Nu conține substanțe nutritive; Compușii săi au ca scop menținerea hidratată a probei, în condiții de pH și osmolaritate adecvate.

-Inhibă autolizatul unor microorganisme delicate, cum ar fi Pneumococ.

-Utilizarea este temporară, nu trebuie prelungită prea mult.

preparare

Mediu Stuart semi-solid cu indicator redox

Pregătirea acasă

ingrediente

Glicerofosfat de sodiu 10 gr

Tioglicolat de sodiu 1,0 gr

Clorură de calciu 0,1 gr

Albastru de metilen 0,002 gr

Agar-agar 3 gr

Apa distilată 1 L

Se amestecă componentele și se încălzește până la dizolvarea completă. Se toarnă în tuburi sau tampoane speciale. Acestea sunt introduse în autoclav și sterilizate la 121ºC timp de 15 minute. Lăsați tuburile să se răcească în poziție verticală (în formă de bloc). Păstrați la temperatura camerei.

Prepararea cu mediu comercial

Cântărește 14,1 g de mediu într-un litru de apă distilată. Se agită frecvent căldura până când se dizolvă complet, se poate fierbe. Restul procedurii așa cum s-a descris deja.

Mediul deshidratat are culoarea cremei și pregătit trebuie să fie albastru pe suprafața sa. Acest lucru se datorează prezenței albastru de metilen.

PH-ul mediului trebuie ajustat la 7,4 ± 0,2

Stuart Medified modificat lichid (de casă)

ingrediente

Glicerofosfat de sodiu 10 gr

Tiogliccolat de sodiu 1 gr

Clorură de calciu dihidrat 0,1 gr

Apa distilata 1000 ml

Are aceleași ingrediente ca semisolidul, dar nu are agar sau albastru de metilen. În acest caz, componentele sunt amestecate fără încălzire și 0,5 ml sunt distribuite în tuburi de 16 x 125 mm cu capace cu șurub.

Se sterilizează într-o autoclavă la 121 ° C timp de 10 minute. Pentru eșantionare, tampoanele de dacron trebuie utilizate dacă eșantionul este pentru PCR sau raion, dacă este pentru cultură.

Tuburile sunt depozitate la temperatura camerei.

Aplicații

Comercial există dispozitive speciale de transport de probe numite cultură; Acest dispozitiv este un tub alungit, subțire, care are un tampon în interior și la capăt există un segment care conține mediul Stuart semi-solid sau lichid.

Dispozitivul este deschis și proba este prelevată cu tamponul. Este apoi introdus înapoi în tub până când vârful tamponului este introdus în mediul de transport semi-solid; Unii aduc un burete de poliuretan impregnat cu mediu lichid Stuart, cu care proba este păstrată atunci când este menținută umedă.

În cazul în care se suspectează prezența microorganismelor delicate, trebuie colectate tampoane de bumbac cu cărbune.

Probele care pot fi prelevate cu tampoane sau tampoane și transferate în acest mediu sunt exudate faringiene, tampoane rectale și diverse secreții, printre care: vaginale, uretrale, răni, oculare, otice și abces.

În timpul transferului eșantionului în mediul de transport în laborator, trebuie evitat supunerea mediului la condiții extreme de mediu (prea frig sau prea cald). De asemenea, trebuie evitate schimbările bruște ale presiunii atmosferice.

Timpul în care mediul este capabil să mențină viabilă un microorganism va depinde de tulpina respectivă. De exemplu, pentru microorganismele din genurile Neisserias și Haemophilus, acestea pot rămâne viabile până la 24 de ore, dar tulpini precum Salmonella sau Shigella pot dura zile și chiar săptămâni.

Dacă se estimează că prelucrarea eșantionului poate dura mai mult de 4 zile, este de preferat să înghețe proba la -70 ° C.

Identificarea eșantionului în mijlocul de transport

Mijloacele de transport pregătite sau cultura cultivată trebuie să aibă o etichetă în care vor fi introduse următoarele informații:

Numele și prenumele pacientului: evită confuzia probei.

Număr de identificare: este convenabil să păstrați o comandă la locul de muncă.

Sursa de colectare a probelor: ajută bacteriologul să aleagă mediile de cultură adecvate.

Medicul curant: Uneori este necesar pentru eventuale consultări.

Data și ora colectării eșantionului: este necesară pentru acceptarea sau respingerea eșantionului în funcție de timpul scurs între colectarea eșantionului și recepția în laborator.

Alte informații care ar fi foarte utile de atașat sunt:

Diagnosticul prezumtiv: ghidează adăugarea de medii de cultură speciale în funcție de diagnosticul suspectat.

Tratament cu antibiotice: este util să fie anexat în antibiogramă.

Toate aceste informații sunt vitale pentru a asigura o prelucrare corectă a eșantionului.

QA

Pentru a evalua performanța mediului Stuart, tulpinile cunoscute pot fi inoculate și păstrate la 25 ° C, cum ar fi: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

În toate cazurile, se preconizează recuperarea microorganismului în cauză, păstrat timp de 24 de ore.

Pe de altă parte, se pot folosi și alte tulpini precum: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 și Escherichia coli ATCC 11775.

În toate cazurile, se preconizează recuperarea abundentă până la 96 de ore.

limitări

Unele studii asigură că glicerofosfatul prezent în mediul Stuart poate fi metabolizat de unele coliforme, printre alte bacterii Gram negative, și, prin urmare, se poate multiplica în acest mediu.

Acest risc crește cu cât întârzie procesarea eșantionului. De asemenea, expunerea Stuart la temperaturi medii la ridicate în timpul transportului influențează acest lucru.

Referințe

1. "Mediu de transport (microbiologie)." Wikipedia, enciclopedia gratuită. 13 Apr 2018, 10:36 UTC. 1 aprilie 2019. Disponibil la adresa: es.wikipedia.org
2. Laboratoare Microkit: Media de cultură. Transport Stuart. Disponibil la: Disponibil la: Medioscultivo.com
3. LabLisan. Mijlocul de transport Stuart. Disponibil la adresa: lablinsan.cl
4. MDM științific. Avantajele existenței unui mediu de transport microbiologic Stuart. Disponibil la adresa: mdmcientifica.com
5. Laboratoarele Metrix Stuart. 2017. Disponibil la adresa: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnostic microbiologic Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosticul microbiologic. 5 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.