MEDIU CARY BLAIR: JUSTIFICARE, PREGĂTIRE ȘI UTILIZĂRI - BIOLOGIE - 2025

Medie Cary Blair este un agar semisolid, utilizat pentru transportul și conservarea probelor biologice care cuprindeau patogenilor intestinali, microorganismele și labil anaerobă. Ca toate mijloacele de transport, funcția sa este să păstreze eșantionul în condiții optime până când este cultivat. Microorganismele patogene prezente, precum și microbiota însoțitoare, trebuie să rămână viabile, fără a crește populația acestora.

Cary Blair Medium este rezultatul schimbării formulării Stuart Transport Medium. Modificarea a fost realizată în 1964 și a constat în înlocuirea sistemului de reglare a pH-ului (glicerofosfat) cu un tampon anorganic fosfatat.

A. Culturette cu Cary Blair Mediu B. Colecție de scaune cu Cary Blair Medium. Sursa: A. Video Meganhow, obțineți o cultură a rănilor 2011 youtube.com B. Utilizator: Mattes

Reformularea a fost necesară, deoarece creatorii săi au realizat că glicerofosfatul după un anumit timp poate fi metabolizat de unele bacterii saprofite. Acestea se înmulțesc suprapun agentii patogeni prezenți.

Alte modificări au fost eliminarea albastrului de metilen, precum și o reajustare a pH-ului spre alcalinitate (pH 8,4). Toate aceste schimbări au îmbunătățit eficiența mijloacelor de transport.

Inițial Cary Blair mediu a fost utilizat pentru întreținerea agenților patogeni intestinali, cum ar fi Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae și Campylobacter sp.

Cu toate acestea, s-a observat ulterior eficacitatea în păstrarea viabilității agenților patogeni exigenti și labile, precum: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae și unele anaerobe.

Bază

Cary Blair Medium conține clorură de sodiu, tiogliccolat de sodiu, fosfat disodic, clorură de calciu și agar.

Clorura de sodiu menține echilibrul osmotic al mediului, fosfatului disodic și clorura de calciu echilibrează pH-ul. La rândul său, tiogliccolatul de sodiu menține un potențial redus de oxidare, în timp ce porțiunea mică de agar oferă consistența semi-solidă.

Mediul Cary Blair nu conține substanțe nutritive, deoarece funcția unui mediu de transport este să păstreze eșantionul fără ca acesta să sufere modificări în ceea ce privește umiditatea și încărcarea microbiană; adică evită deshidratarea eșantionului păstrând viabilitatea și cantitatea de microorganisme prezente.

În cele din urmă, pH-ul ușor alcalin previne moartea microorganismelor prin aciditate, în special Vibrio-urile sunt foarte sensibile la acizi.

preparare

Mediul Cary Blair este disponibil comercial ca dispozitiv special gata de utilizare. Sistemul de transport este acoperit de o pungă de plastic Peel Pack. În interior conține un tampon pentru colectarea eșantionului și tubul recipientului pentru mediu semi-solid al lui Cary Blair.

De asemenea, pe piață există case comerciale care furnizează mediul deshidratat pentru pregătirea acestuia în laborator.

Pentru a face acest lucru, cântăriți 13,2 g de mediu deshidratat și dizolvați-l într-un litru de apă distilată. Se încălzește și se agită preparatul până la dizolvarea completă. Distribuiți mediul în eprubete cu șuruburi (Bakelite).

Se fierbe tuburile timp de 15 minute. Lăsați să se răcească și mențineți la temperatura camerei până la utilizare.

Mediul Cary Blair neinoculat poate fi păstrat optim timp de până la 18 luni la temperatura camerei.

PH-ul mediului trebuie ajustat la 8,4 ± 0,2. Culoarea mediului preparat este bej, cu o anumită opalescență.

Utilizare

Tipul probelor

Cary Blair Medium este utilizat atunci când probele de scaun, tampoanele rectale și tampoanele vaginale nu pot fi procesate imediat.

Când nu este disponibil niciun mijloc de transport, probele pot fi păstrate la -70 ° C.

Prelevarea de probe

Tamponul este impregnat cu proba și este introdus în mediul Cary Blair, fără a ajunge la fund.

Identificarea probei

Mediul Cary Blair trebuie să aibă o etichetă pe care sunt plasate datele de bază, cum ar fi: numele și prenumele pacientului, numărul de identificare al eșantionului, sursa colectării eșantionului, medicul curant, data și ora colectării. proba, diagnostic prezumtiv, tratament cu antibiotice.

Transfer

Strâns acoperite și transportate la temperatura camerei în cazul probelor fecale. Întrucât, pentru probele vaginale în căutarea microorganismelor anaerobe, se recomandă transportarea probelor la 4 ° C.

În toate cazurile, timpul de transfer recomandat este de 4-6 ore, cu maximum 24 de ore.

Dacă se suspectează prezența Campylobacter jejuni în probele de scaun și acestea nu pot fi procesate în 24 de ore, se recomandă depozitarea în mediu Cary Blair la 4 ° C.

Investigațiile efectuate pe mijloacele de transport ale Cary Blair

Mai multe studii au arătat că mediul Cary Blair poate rămâne viabil la microorganismele enteropatogene din genul Shigella și Salmonella până la 49 de zile după prelevarea probei.

Vibrio cholerae, un alt agent patogen important, este capabil să supraviețuiască timp de 22 de zile, în timp ce Yersinia pestis (agent cauzator al ciumei bubonice și pneumonice) poate fi recuperată după 75 de zile.

Cu toate acestea, în ciuda durabilității demonstrate în ceea ce privește recuperarea acestor microorganisme, se recomandă ca probele prelevate să fie transportate în mediu Cary Blair la laborator cât mai repede posibil.

De asemenea, odată ce eșantionul ajunge în laborator, acesta trebuie însămânțat fără întârziere în mediile de cultură respective.

Pe de altă parte, mediu Cary Blair, pe lângă faptul că este util pentru transportul microorganismelor facultative, este recomandat și pentru probele care conțin agenți patogeni anaerobi.

În acest sens, DeMarco și colab., În 2017, au realizat un studiu intitulat: Supraviețuirea microorganismelor vaginale în trei sisteme de transport disponibile comercial.

Ei au demonstrat că Cary Blair Transport Medium este cel mai bun mediu de transport pentru conservarea și recuperarea microorganismelor anaerobe vaginale. De asemenea, aceștia au arătat că cea mai mare rată de recuperare a fost obținută atunci când temperatura de transfer a fost de 4 ° C.

Prin urmare, se concluzionează că temperatura de transport pentru tampoanele vaginale (microorganisme anaerobe) trebuie să fie la 4 ° C. În timp ce pentru probele fecale în căutarea microorganismelor facultative, temperatura ideală este temperatura camerei.

QA

Pentru a evalua controlul calității tulpinilor cunoscute de mediu Cary Blair, cum ar fi Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae și Campylobacter sp.

Mediul este inoculat cu tulpina aleasă și menținut la temperatura camerei timp de 24 de ore. Acestea sunt apoi semănate în mediile de cultură corespunzătoare. În toate cazurile, se preconizează o recuperare satisfăcătoare a microorganismului în cauză.

Referințe

1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN și colab. Supraviețuirea microorganismelor vaginale în trei sisteme de transport disponibile comercial. Anaerob. 2017; 45: 44–49.
2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Comparația mediilor de conservare pentru depozitarea probelor de scaun. J Clin Microbiol. o mie noua sute nouazeci si cinci; 33 (8): 2176–2178.
3. Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Compararea mediilor de conservare și a condițiilor de îngheț pentru depozitarea epruvetelor de fecale. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosticul microbiologic. 5 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnostic microbiologic Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
6. Laboratoarele Conda Pronadisa. Jumătate Cary Blair. Disponibil la adresa: condalab.com
7. Laboratorul Metrix Cary Blair. Disponibil la: metrixlab.mx