CE ESTE O COLORARE SIMPLĂ? CARACTERISTICI DEOSEBITE - BIOLOGIE - 2025

Unică colorația este o procedură rapidă colorare și simplă în care este utilizat un singur colorant, așa este numit simplu. Este utilizat în principal pentru a determina morfologia și organizarea celulelor prezente într-un eșantion.

Celulele sunt incolore în mod natural, de aceea este necesar să le facem vizibile într-un fel atunci când sunt privite la microscop.

Celulele obrazului uman colorate de o colorare simplă de albastru de metilen.

Este important de menționat că coloranții folosiți în colorarea simplă trebuie să fie fundamentali cu o sarcină pozitivă (cationică), astfel încât să se poată lega spontan de peretele celular și de citoplasmă.

Aceste structuri celulare sunt încărcate negativ. Acesta este motivul pentru care colorantul încărcat pozitiv este atras de celule și se leagă spontan de ele. Astfel, toate celulele prezente într-un eșantion sunt colorate rapid.

Coloranți folosiți în colorarea simplă

Există mai multe pete de bază care pot fi utilizate în laboratorul de microbiologie. Cele mai utilizate sunt:

- Albastru de metil.

- Violet de cristal.

- verde Malachit.

- Fucsin de bază.

Toți acești coloranți funcționează bine în bacterii, deoarece au ioni de culoare (cationici) încărcați pozitiv (cromofori).

Timpurile de colorare pentru majoritatea acestor pete sunt relativ scurte. În general, acestea variază de la 30 de secunde la 2 minute, în funcție de afinitatea colorantului.

Este important să rețineți că, înainte de colorarea unui eșantion prin colorarea simplă, acesta trebuie extins și fixat pe diapozitivul de sticlă; proba extinsă și fixă ​​se numește frotiu.

Cei 6 pași către o colorare simplă

Pasul 1

Așezați lamela pe un suport pentru colorare și aplicați pata dorită. Lasă timpul să acționeze.

În mod normal, o colorare simplă durează câteva secunde până la câteva minute, în funcție de pata folosită.

Observare

În această etapă este important să nu depășim timpul recomandat pentru colorantul folosit, deoarece pe foaie s-ar putea forma cristale, producând ceea ce sunt cunoscute sub numele de „artefacte” care distorsionează morfologia celulelor.

Pasul 2

Spălați bine frotiul de pe lamelă cu apă distilată dintr-o sticlă sau, de asemenea, apă de la robinet care curge lent, până când scurgerile devin limpezi. Acest lucru durează de obicei 5-10 secunde.

Observare

Nu aplicați fluxul de apă direct pe frotiu, pentru a evita ca forța aceluiași să afecteze eșantionul.

Dacă nu aveți apă distilată, puteți utiliza apa de la robinet fără probleme, deoarece aceasta nu va afecta rezultatul colorației.

Pasul 3

Ștergeți diapozitivul cu șervețele absorbante de hârtie într-o direcție și fără a freca. Asigurați-vă că partea inferioară a toboganului este curată.

Pasul 4

Observați frotiul pătat sub microscop. Începeți cu cele mai îndepărtate obiective pentru a localiza corect zona pe care doriți să o observați mai detaliat. Schimbați obiectivul pentru a vă apropia și mai aproape de eșantion.

Observare

Pentru utilizarea obiectivului cu mărire mai mare (în mod normal 100X), ar trebui să se utilizeze ulei de imersiune, deoarece aceasta ajută lumina să pătrundă mai bine și imaginea să fie mai ascuțită. Nu este necesar să folosiți o copertină.

Pasul 5

În cele din urmă, aruncați toate eșantioanele într-un recipient adecvat, care este etichetat în mod corespunzător "pericol bio".

Referințe

1. (2001). Aplicații microbiologice: manual de laborator în microbiologie generală ( ediția a ^VIII -a). Companiile McGraw-Hill.
2. Harisha, S. (2006). O introducere în biotehnologie practică ( ^{prima etapă} ) Firewall Media.
3. Moyes, RB, Reynolds, J., & Breakwell, DP (2009). Colorarea preliminară a bacteriilor: pete simple. Protocoale actuale în microbiologie, (SUPPL. 15), 1–5.
4. Pommerville, J. (2013). Bazele Alcamo pentru Laboratorul de Microbiologie (a 10- ^a ). Jones & Bartlett Learning.
5. Prescott, H. (2002). Exerciții de laborator în microbiologie (5- ^a ) Companiile McGraw-Hill.
6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Principiile microbiologiei (1 ^st .). Tata McGraw-Hill Education.