CULTURA SÂNGELUI: PENTRU CE ESTE VORBA, JUSTIFICARE, PROCEDURĂ, REZULTATE - BIOLOGIE - 2025

Cultura sângelui este un test bacteriologic , care urmărește să detecteze prezența microorganismelor în sânge. Sângele este un lichid steril prin natură și, prin urmare, trebuie păstrat în condiții fiziologice, astfel încât prezența bacteriilor sau ciupercilor în sânge este întotdeauna patologică.

Când bacteriile sau ciupercile se găsesc în sânge, dar înmulțirea nu depășește eliminarea microorganismelor de către sistemul imunitar, se numește bacteremie (pentru bacterii) sau fungemie (pentru ciuperci); Dar dacă microorganismele cresc incontrolabil ca număr, se numește septicemie.

Sticle de cultură de sânge (galben: aerobioză pediatrică, verde: aerobioză adultă și roșu: anaerobioză adultă). Sursa: fotografie realizată de autor MSc Marielsa Gil.

Bacteremia, fungemia și septicemia pun în pericol viața pacientului și, prin urmare, trebuie tratate imediat. De aceea, atunci când există suspiciuni de infecție în sânge, medicii solicită un studiu de cultură a sângelui.

Această analiză bacteriologică permite să știm dacă există sau nu o infecție în sânge și care este microorganismul implicat. În plus, dacă este pozitiv, se efectuează un test de sensibilitate pentru a ști ce antibiotic sau antifungic ar putea fi utilizat în tratament.

Dacă, pe de altă parte, cultura de sânge este negativă la 24 de ore de la incubare, nu trebuie aruncată până când este negativă pentru 240 de ore. Acest lucru asigură că nu există microorganisme cu creștere lentă.

Pentru ca cultura de sânge să fie fiabilă, trebuie luate măsuri aseptice extreme atunci când se prelevează eșantionul și pentru a crește fiabilitatea și sensibilitatea testului, trebuie să fie luate minimum două probe în timpul sau în apropierea vârfului febrei.

Pentru ce este?

Sângele este un lichid steril și atunci când se găsesc microorganisme în acesta este 100% patologic. Această situație reprezintă un tablou clinic foarte delicat, care compromite viața pacientului.

Cultura sângelui este un test bacteriologic important care detectează prezența microorganismelor în fluxul sanguin.

Microorganismele pot ajunge în sânge pe diferite căi, care ar putea fi infecții extravasculare precum: pneumonie, infecții intraabdominale, pielonefrită, infecții grave ale pielii, țesuturi moi sau artrită, printre altele.

Sau poate fi, de asemenea, intravenos, de exemplu, contaminarea cateterelor intravenoase sau arteriale, endocardită, dependență de droguri intravenoase, administrarea de medicamente sau soluții contaminate etc.

Detectarea și tratarea agentului cauzal al sepsisului în timp este esențială pentru a asigura supraviețuirea pacientului.

În acest sens, medicul ar trebui să indice realizarea unei culturi de sânge atunci când observă semne și simptome care sugerează septicemie, cum ar fi: febră (mai mare de 38 ° C) fără a se concentra aparent infecțioase sau, dimpotrivă, hipotermie (<de 36 ° C).

Alte semne pot fi: frisoane, creșterea numărului de celule albe din sânge (> 10.000 celule / mm ³ ) sau scăderea semnificativă a celulelor polimorfonucleare (<1.000 PMN / mm ³ ). La fel ca și deteriorarea multiorgană sau pierderea vitalității brusc, printre alte semne de avertizare.

Bacteremia poate fi constantă, tranzitorie sau intermitentă. Acest lucru este important pentru eșantionare, deoarece este necesar să se ia atunci când există o probabilitate mai mare de a găsi microorganismul în circulație.

Prin urmare, se recomandă să luați cel puțin 2 probe în locuri diferite. În plus, idealul este ca proba să fie luată în vârfuri febrile sau atunci când pacientul prezintă frison, hipotermie extremă, transpirație sau tahicardie.

Cu toate acestea, pentru ca cultura de sânge să fie un instrument cu adevărat util, eșantionul trebuie luat cu mare atenție. O manipulare proastă sau o asepsie proastă în momentul luării probei poate invalida testul, obținând falsuri pozitive.

Bază

Studiul constă în prelevarea aseptică a două sau trei probe de sânge și plasarea acestuia în sticle speciale.

Dispozitive speciale pentru cultivarea probelor de sânge se numesc sticle de cultură de sânge Acestea sunt clasificate în:

În funcție de vârsta pacientului

-Utilizare pediatrică

-Pentru adulti.

În funcție de tipul de microorganism

-Fluxuri pentru microorganisme aerobe (bacterii aerobe, bacterii facultative și ciuperci).

-Butelele de cultură pentru microorganisme anaerobe (bacterii anaerobe stricte).

Unele conțin un mediu de cultură lichid și altele conțin un mediu de cultură solid și lichid în același timp. De asemenea, există cu particule de carbon activate.

Proces

Recomandări pentru eșantionare

- Eșantionul care urmează să fie preluat de către personal foarte calificat și instruit în domeniul microbiologiei.

- Asseza sau curățarea minuțioasă a locului de recoltare a probelor este, fără îndoială, cel mai important pas.

- Ca în cazul tuturor eșantionărilor, personalul medical trebuie să respecte pe deplin măsurile de biosiguranță pe parcursul procesului (utilizarea mănușilor, halatului, ochelarilor, printre altele).

- Aveți grijă ca toate instrumentele necesare pentru prelevarea de probe să fie disponibile.

- Etichetați flacoanele cu numele complet al pacientului, data, numărul de evidență medicală, timpul de colectare a probelor și numărul secvenței de laborator.

-Idealul este să luați proba înainte ca pacientul să înceapă terapia antimicrobiană. Este indicat doar în cazul în care se suspectează nefuncționarea tratamentului în curs. În acest caz, eșantionul trebuie prelevat înainte de schimbarea medicamentului, folosind sticle de cultură de sânge cu inhibitori de antibiotice (particule de carbon activate).

- Trebuie luate cel puțin 2 probe în diferite situri anatomice, cum ar fi brațul drept și brațul stâng. În endocardita suspectată, se recomandă 3 probe. Două sticle vor fi incluse în fiecare probă (una pentru aerobioză și alta pentru anaerobioză).

Cantitate de eșantion

Cantitatea de probă variază în funcție de vârsta pacientului, dar raportul 1: 5 până la 1:10 trebuie să fie întotdeauna menținut în ceea ce privește diluarea cu bulion de sânge / cultură.

La nou-născuți, cantitatea de eșantion recomandată este de 1 ml de sânge pe flacon. Se folosește sticlă pediatrică.

În cazul sugarilor între o lună și un an, acesta poate fi crescut la 1,5 ml sânge pe flacon. Se folosește sticlă pediatrică.

La copiii mai mari de 2 ani, cantitatea corespunzătoare de eșantion este de 2,5 ml sânge pe flacon. Se folosește sticlă pediatrică.

De la adolescență poate fi crescut la un volum de sânge între 5 - 10 ml pe sticlă. Se folosește o sticlă pentru adulți.

În cele din urmă, în stadiul adult, cantitatea necesară este de 8-10 ml pe sticlă. Se folosește o sticlă pentru adulți.

Prelevarea de probe

- Proba de sânge poate fi venoasă sau arterială. Cu toate acestea, sângele arterial este luat numai atunci când eșantionarea venoasă este imposibilă.

- Nu se recomandă prelevarea unui eșantion dintr-un cateter venos central decât dacă:

1. Este imposibil să luați eșantionul periferic (venos sau arterial).
2. Pacienții cu risc de sângerare.
3. Când medicul suspectează bacteriemie din cauza contaminării cateterului venos central.
4. Când febra reapare după o încetare febrilă de 4 până la 5 zile, indiferent dacă pacientul este sau nu în tratament antimicrobian.

Asepsis înainte de prelevare

- Alegeți siturile anatomice pentru eșantionare. În general, se aleg venele de cel mai bun calibru (vene bazilice sau cefalice).

- Conform Centrelor de Control al Bolilor (CDC) din Atlanta (SUA), operatorul trebuie să se spele pe mâini cu 2% clorhexidină sau 10% povidonă iod înainte de eșantionare, pe lângă purtarea mănușilor.

-Palpați și localizați vena care trebuie utilizată.

-Curățați zona de puncție într-un mod rotativ, făcând mișcări de la centru spre exterior, folosind clorhexidină săpună sau săpun antiseptic. Clătiți cu soluție salină sterilă.

Ulterior, aplicați un antiseptic și lăsați-l să acționeze. Exemplu de clorhexidină gluconat 0,5% timp de 1 minut sau povidonă iod 10% timp de 2 minute. Pentru aceștia din urmă, întrebați mai întâi dacă pacientul este alergic la iod. Dacă sunteți alergic, puteți înlocui 70% alcool.

Extracția probei

- Plasați turniquetul pentru a exacerba fluxul de sânge și a încolți vena.

- Nu atingeți din nou locul de puncție cu degetul. Dacă acest lucru este strict necesar, degetul trebuie spălat la fel ca zona de puncție.

-Introduceți acul injectorului sau scalpul în venă și extrageți cantitatea necesară de sânge.

-Nu pune bumbac sau tifon pe ac atunci când îl scoateți dacă nu este steril.

-Scoateți sigiliul de securitate din sticle foarte atent și fără a atinge capacul. Unii autori recomandă efectuarea unei dezinfectări a capacului înainte de a inocula proba.

- Distribuie cantitatea corespunzătoare de sânge în flacoane. Dacă eșantionul este preluat cu un injector, cantitatea necesară este turnată mai întâi în balonul anaerob și apoi în balonul aerob. Dacă luarea se face cu scalp (fluture), se toarnă în sens invers.

- Amestecați ușor sticla de cultură de sânge prin inversare.

- Schimbați mănușile și repetați pașii precedenți pentru cea de-a doua colecție de probe.

-Dacă cel de-al doilea eșantion este preluat de pe un alt loc, acesta poate fi făcut imediat, dar dacă este de la același site, trebuie să așteptați 30 până la 90 de minute între un eșantion și altul.

- Eșantionul trebuie dus în laborator cât mai curând posibil, dacă acest lucru nu este posibil, trebuie lăsat la temperatura camerei până la 18 ore.

Cultură

Odată ajunși în laborator, flacoanele sunt incubate la 37 ° C în condițiile fiecărui balon, adică în aerobioză și respectiv anaerobioză.

În conformitate cu metoda manuală, sunetul trebuie pornit la 24 de ore de la incubare și apoi să sune inter-zilnic. Inelele sunt efectuate după cum urmează: mai întâi capacul flaconului este dezinfectat și se introduce acul unui injector steril. Lichidul este extras din balon și semănat pe agar de sânge și agar de ciocolată.

Dacă există creștere, se efectuează un Gram, subculturi în medii specifice, teste biochimice și antibiogramă.

În metodele automate, echipamentul Bact / Alert emite o alarmă atunci când detectează că un flacon este pozitiv. În același mod, trebuie aplicat agar de sânge și agar de ciocolată.

O altă metodă care câștigă teren este analizarea balonului după 6 ore de incubare prin spectrometrie de masă. Această metodă a ajutat la creșterea sensibilității și vitezei diagnosticului.

Rezultate

Atâta timp cât sticla de cultură de sânge este negativă, raporturile intermediare preliminare pot fi furnizate medicului curant. Raportul indică faptul că este negativ în orele în care a fost incubat. De exemplu, dacă este negativ până în a patra zi, va fi raportat după cum urmează:

Rezultat preliminar: cultură negativă la 96 de ore de incubare.

Notă: studiul continuă timp de 240 de ore.

Dacă cultura de sânge este pozitivă, medicul curant este informat imediat și se transmite un raport cu cel puțin gramul coloniei. Exemplu:

Rezultat preliminar: în cultura pozitivă la 48 de ore de incubare, se observă bacili gram negativi și oxidază negativă. Identificarea și testarea sensibilității sunt în proces.

Aceste informații îndrumă medicul curant să înceapă o terapie empirică spre posibilul microorganism, în așteptarea rezultatului final al laboratorului.

După finalizarea studiului bacteriologic, adică a fost identificat microorganismul și antibiograma este disponibilă, raportul final trebuie trimis cât mai curând posibil.

Trebuie avut grijă specială dacă microorganismul țintă este Neisseria gonorrhoeae sau Neisseria meningitidis, deoarece aceste bacterii sunt inhibate în prezența unor concentrații mari de polianosulfonat de sodiu (SPS).

De aceea, acest compus nu trebuie să depășească 0,025% în sticlele de cultură de sânge.

Pe de altă parte, dacă eșantionul de cultură de sânge este prelevat pentru prima dată în tuburile Vacutainer, aceste tuburi au concentrații de SPS toxice pentru meningococi și gonococi, deci sângele trebuie transferat în 1 oră către sistemul de cultură de bulion.

Cum se poate spune dacă o cultură a sângelui este pozitivă sau contaminare

O cultură de sânge este considerată contaminată atunci când există creștere într-un singur flacon de cultură de sânge din totalul prelevat. Și suspiciunea de contaminare crește dacă microorganismul izolat este o microbiotă cutanată obișnuită: exemplu: Staphylococcus coagulase negative, Propionibacterium spp, printre altele.

Cu toate acestea, la pacienții imunocompromovați, nu trebuie neglijat niciun microorganism, dar în acest caz microorganismul ar trebui să apară în mai multe probe.

Pe de altă parte, dacă sensibilitatea la antibiotice ale aceluiași microorganism izolat în două probe diferite este aceeași, infecția este reală.

O altă caracteristică este încărcarea bacteriană, deoarece culturile de sânge contaminate cresc târziu, în timp ce infecțiile reale la pacienții netratați sunt, în general, pozitivi la 14 ore de incubare, atunci când microorganismul nu este deranjant.

Pe de altă parte, la pacienții tratați cu antimicrobiene, microorganismul implicat poate dura timp pentru a crește, deoarece sarcina este foarte mică.

Apariția mai multor microorganisme poate sugera contaminarea, dar dacă același rezultat se repetă în mai multe focuri de pe diferite site-uri, atunci este real.

Referințe

1. "Hemocultură." Wikipedia, enciclopedia gratuită. 3 iulie 2019, ora 17:28 UTC. 14 iulie 2019, ora 19:05 ro.wikipedia.org
2. Hervé B. Noi tehnologii în diagnosticul microbiologic: automatizare și unele aplicații în identificarea și studiul susceptibilității microbiene. Rev. Med. Clin. Numără. 2015; 26 (6) 753-763. Disponibil la adresa: reader.elsevier.com
3. Villarroel P. Capitolul 20: Sepsis și risc de boli cardiovasculare. Sănătatea cardiovasculară. pp. 187-194. Disponibil la adresa: fbbva.es
4. Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM Culturi de sânge: Ce v-au spus și ce faceți? Bolnav glob. 2012; 11 (26): 146-163. Disponibil la adresa: scielo.isc
5. Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. Probabilitatea succesului obținerii unei culturi sanguine pozitive. Med. Interna Mex. 2017; 33 (1): 28-40. Disponibil pe: scielo.org